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主辦：天津藥物研究院 中國(guó)藥學(xué)會(huì)
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2024年第47卷第9期文章目次
2024, 47(9):1937-1943.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.001
摘要:
移植物抗宿主?。℅vHD）是異基因造血干細(xì)胞移植（Allo-HSCT）后主要的并發(fā)癥和死亡原因。根據(jù)臨床特征GvHD主要分為急性GvHD和慢性GvHD，可累及皮膚、肝臟、胃腸道等全身多個(gè)器官，是一種嚴(yán)重且異質(zhì)性高的疾病。糖皮質(zhì)激素是GvHD一線系統(tǒng)治療，激素難治GvHD的患者預(yù)后較差。近年來，GvHD新藥研發(fā)成為熱點(diǎn)，伊布替尼、蘆可替尼、貝舒地爾相繼在國(guó)際獲批用于GvHD二線和/或后線治療用藥，國(guó)內(nèi)也有多個(gè)創(chuàng)新藥正處于臨床研發(fā)階段。在總結(jié)近年上市藥物臨床研發(fā)經(jīng)驗(yàn)以及國(guó)外監(jiān)管考量的基礎(chǔ)上，從技術(shù)審評(píng)角度，結(jié)合GvHD臨床需求、疾病和藥物特點(diǎn)、國(guó)內(nèi)外差異等，對(duì)GvHD治療藥物的臨床研發(fā)和評(píng)價(jià)中關(guān)注的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行討論，以期為此類藥物的臨床研發(fā)和評(píng)價(jià)提供參考，加快創(chuàng)新藥物研發(fā)。
移植物抗宿主?。℅vHD）是異基因造血干細(xì)胞移植（Allo-HSCT）后主要的并發(fā)癥和死亡原因。根據(jù)臨床特征GvHD主要分為急性GvHD和慢性GvHD，可累及皮膚、肝臟、胃腸道等全身多個(gè)器官，是一種嚴(yán)重且異質(zhì)性高的疾病。糖皮質(zhì)激素是GvHD一線系統(tǒng)治療，激素難治GvHD的患者預(yù)后較差。近年來，GvHD新藥研發(fā)成為熱點(diǎn)，伊布替尼、蘆可替尼、貝舒地爾相繼在國(guó)際獲批用于GvHD二線和/或后線治療用藥，國(guó)內(nèi)也有多個(gè)創(chuàng)新藥正處于臨床研發(fā)階段。在總結(jié)近年上市藥物臨床研發(fā)經(jīng)驗(yàn)以及國(guó)外監(jiān)管考量的基礎(chǔ)上，從技術(shù)審評(píng)角度，結(jié)合GvHD臨床需求、疾病和藥物特點(diǎn)、國(guó)內(nèi)外差異等，對(duì)GvHD治療藥物的臨床研發(fā)和評(píng)價(jià)中關(guān)注的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行討論，以期為此類藥物的臨床研發(fā)和評(píng)價(jià)提供參考，加快創(chuàng)新藥物研發(fā)。
2024, 47(9):1944-1959.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.002
摘要:
目的 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)合譜效關(guān)系及分子對(duì)接，探討五味甘露抗炎的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制。方法 利用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)（TCMSP）、Genecards、Pubchem、UniProt、中國(guó)學(xué)術(shù)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)（CNKI）等數(shù)據(jù)庫(kù)篩選五味甘露的活性成分及抗炎的作用靶點(diǎn)，利用STRING數(shù)據(jù)庫(kù)、Cytoscape3.7軟件構(gòu)建蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)并篩選核心靶點(diǎn)，利用Metascape數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行基因本體（GO）及京都基因與基因組百科全書（KEGG）通路富集分析。將細(xì)胞炎癥模型與高效液相色譜法相結(jié)合分析五味甘露不同極性部位的抗炎活性和藥效成分。采用Discovery Studio Lib Dock軟件將主要藥效成分與核心靶點(diǎn)進(jìn)行分子對(duì)接，并進(jìn)行可視化分析。結(jié)果 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析共獲取五味甘露抗炎成分125個(gè)，潛在抗炎靶點(diǎn)251個(gè)，得到核心靶點(diǎn)131個(gè)，包括腫瘤壞死因子（TNF）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）重要靶點(diǎn)。KEGG通路富集分析，共富集到20條相關(guān)通路，其中涉及基因較多的包括脂質(zhì)與動(dòng)脈粥樣硬化和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）等通路，諸多通路均涉及NOD樣受體熱蛋白結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白3（NLRP3）核心靶點(diǎn)。五味甘露的醋酸乙酯相能夠抑制炎癥相關(guān)的NLRP3、IL-1β、TNF的表達(dá)，且其中總黃酮含量最高，為（305.0±11.4）mg·g-1。LC-MS圖譜分析和分子對(duì)接實(shí)驗(yàn)顯示醋酸乙酯相中山柰酚、楊梅素、異葒草素、異槲皮苷和黃芪苷等黃酮類物質(zhì)的離子強(qiáng)度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于單味藥材且其母核結(jié)構(gòu)與NLRP3受體蛋白的7個(gè)氨基酸活性位點(diǎn)有顯著的相互作用。結(jié)論 五味甘露抗炎的主要物質(zhì)為黃酮類，可通過抑制NLRP3炎癥小體的活化起到抗炎作用。
目的 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)合譜效關(guān)系及分子對(duì)接，探討五味甘露抗炎的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制。方法 利用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)（TCMSP）、Genecards、Pubchem、UniProt、中國(guó)學(xué)術(shù)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)（CNKI）等數(shù)據(jù)庫(kù)篩選五味甘露的活性成分及抗炎的作用靶點(diǎn)，利用STRING數(shù)據(jù)庫(kù)、Cytoscape3.7軟件構(gòu)建蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)并篩選核心靶點(diǎn)，利用Metascape數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行基因本體（GO）及京都基因與基因組百科全書（KEGG）通路富集分析。將細(xì)胞炎癥模型與高效液相色譜法相結(jié)合分析五味甘露不同極性部位的抗炎活性和藥效成分。采用Discovery Studio Lib Dock軟件將主要藥效成分與核心靶點(diǎn)進(jìn)行分子對(duì)接，并進(jìn)行可視化分析。結(jié)果 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析共獲取五味甘露抗炎成分125個(gè)，潛在抗炎靶點(diǎn)251個(gè)，得到核心靶點(diǎn)131個(gè)，包括腫瘤壞死因子（TNF）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）重要靶點(diǎn)。KEGG通路富集分析，共富集到20條相關(guān)通路，其中涉及基因較多的包括脂質(zhì)與動(dòng)脈粥樣硬化和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）等通路，諸多通路均涉及NOD樣受體熱蛋白結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白3（NLRP3）核心靶點(diǎn)。五味甘露的醋酸乙酯相能夠抑制炎癥相關(guān)的NLRP3、IL-1β、TNF的表達(dá)，且其中總黃酮含量最高，為（305.0±11.4）mg·g-1。LC-MS圖譜分析和分子對(duì)接實(shí)驗(yàn)顯示醋酸乙酯相中山柰酚、楊梅素、異葒草素、異槲皮苷和黃芪苷等黃酮類物質(zhì)的離子強(qiáng)度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于單味藥材且其母核結(jié)構(gòu)與NLRP3受體蛋白的7個(gè)氨基酸活性位點(diǎn)有顯著的相互作用。結(jié)論 五味甘露抗炎的主要物質(zhì)為黃酮類，可通過抑制NLRP3炎癥小體的活化起到抗炎作用。
2024, 47(9):1960-1970.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.003
摘要:
目的 探究清金益氣顆粒抗疲勞的作用及潛在作用機(jī)制。方法 通過中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)（TCMSP）、高通量中藥實(shí)驗(yàn)和參考指南數(shù)據(jù)庫(kù)（HERB）、PubChem、Swiss Target Prediction等數(shù)據(jù)庫(kù)獲取藥物活性成分和作用靶點(diǎn)；通過GeneCards、OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)收集疲勞的作用靶點(diǎn)；利用VENNY 2.1獲取藥物與疾病交集靶點(diǎn)，再聯(lián)合Cytoscape 3.9.1軟件構(gòu)建藥物-活性成分-疲勞交集靶點(diǎn)相互關(guān)系網(wǎng)絡(luò)；將交集靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫(kù)構(gòu)建蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)并利用DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)交集靶點(diǎn)進(jìn)行基因本體（GO）和京都基因與基因組百科全書（KEGG）通路富集分析，預(yù)測(cè)清金益氣顆粒抗疲勞的作用機(jī)制；選取關(guān)鍵活性成分和核心靶點(diǎn)進(jìn)行分子對(duì)接。通過負(fù)重力竭游泳實(shí)驗(yàn)觀察小鼠負(fù)重力竭游泳時(shí)間；非負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)測(cè)定小鼠血清乳酸（BLA）、尿素氮（BUN）、乳酸脫氫酶（LDH）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、肝糖原（LG）、肌糖原（MG）、葡萄糖（GLU）等指標(biāo)評(píng)價(jià)清金益氣顆?？蛊谒幮?。結(jié)果 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接結(jié)果顯示清金益氣顆?？蛊诘?10個(gè)潛在作用靶點(diǎn)主要富集在磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B（PI3K-AKT）、絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）、缺氧誘導(dǎo)因子1（HIF-1）、叉頭框蛋白O（FoxO）等信號(hào)通路上，其主要活性成分和關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白結(jié)合能力較好。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，清金益氣顆?？赏ㄟ^延長(zhǎng)小鼠負(fù)重5%力竭游泳時(shí)間，降低非負(fù)重游泳小鼠血清中BLA、BUN、MDA水平，增加機(jī)體LG、MG、GLU水平儲(chǔ)存和LDH、SOD、GSH-Px活性發(fā)揮抗疲勞作用。結(jié)論 清金益氣顆粒可能通過調(diào)節(jié)PI3K-AKT、MAPK、HIF-1、FoxO等信號(hào)通路影響機(jī)體能量代謝和氧化應(yīng)激發(fā)揮抗疲勞的作用。
目的 探究清金益氣顆粒抗疲勞的作用及潛在作用機(jī)制。方法 通過中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)（TCMSP）、高通量中藥實(shí)驗(yàn)和參考指南數(shù)據(jù)庫(kù)（HERB）、PubChem、Swiss Target Prediction等數(shù)據(jù)庫(kù)獲取藥物活性成分和作用靶點(diǎn)；通過GeneCards、OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)收集疲勞的作用靶點(diǎn)；利用VENNY 2.1獲取藥物與疾病交集靶點(diǎn)，再聯(lián)合Cytoscape 3.9.1軟件構(gòu)建藥物-活性成分-疲勞交集靶點(diǎn)相互關(guān)系網(wǎng)絡(luò)；將交集靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫(kù)構(gòu)建蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)并利用DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)交集靶點(diǎn)進(jìn)行基因本體（GO）和京都基因與基因組百科全書（KEGG）通路富集分析，預(yù)測(cè)清金益氣顆粒抗疲勞的作用機(jī)制；選取關(guān)鍵活性成分和核心靶點(diǎn)進(jìn)行分子對(duì)接。通過負(fù)重力竭游泳實(shí)驗(yàn)觀察小鼠負(fù)重力竭游泳時(shí)間；非負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)測(cè)定小鼠血清乳酸（BLA）、尿素氮（BUN）、乳酸脫氫酶（LDH）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、肝糖原（LG）、肌糖原（MG）、葡萄糖（GLU）等指標(biāo)評(píng)價(jià)清金益氣顆?？蛊谒幮?。結(jié)果 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接結(jié)果顯示清金益氣顆?？蛊诘?10個(gè)潛在作用靶點(diǎn)主要富集在磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B（PI3K-AKT）、絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）、缺氧誘導(dǎo)因子1（HIF-1）、叉頭框蛋白O（FoxO）等信號(hào)通路上，其主要活性成分和關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白結(jié)合能力較好。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，清金益氣顆?？赏ㄟ^延長(zhǎng)小鼠負(fù)重5%力竭游泳時(shí)間，降低非負(fù)重游泳小鼠血清中BLA、BUN、MDA水平，增加機(jī)體LG、MG、GLU水平儲(chǔ)存和LDH、SOD、GSH-Px活性發(fā)揮抗疲勞作用。結(jié)論 清金益氣顆粒可能通過調(diào)節(jié)PI3K-AKT、MAPK、HIF-1、FoxO等信號(hào)通路影響機(jī)體能量代謝和氧化應(yīng)激發(fā)揮抗疲勞的作用。
2024, 47(9):1971-1984.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.004
摘要:
目的 通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)以及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探討六棱菊對(duì)代謝相關(guān)脂肪性肝?。∕AFLD）模型小鼠的干預(yù)作用及潛在的分子機(jī)制。方法 通過文獻(xiàn)檢索得到六棱菊的活性成分，通過SwissTargetPredicton和疾病數(shù)據(jù)庫(kù)（GeneCards）和PharmMapper數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)六棱菊成分相關(guān)靶標(biāo)，Genecards數(shù)據(jù)庫(kù)獲取MAFLD和氧化應(yīng)激相關(guān)靶標(biāo)，通過STRING和Cytoscape3.9.1軟件建立蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)模型并找到關(guān)鍵靶點(diǎn)。對(duì)六棱菊治療MAFLD的靶標(biāo)進(jìn)行GO富集分析與KEGG通路富集分析。將50只C57BL/6J雄性無菌小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后隨機(jī)分為5組，分別為對(duì)照組、模型組及六棱菊提取物低、中、高劑量（1.25、2.50、5.00 g·kg-1）組；小鼠給予高脂飼料8周進(jìn)行MAFLD造模，造模后給藥6周。實(shí)驗(yàn)第14周末處死小鼠，比較各組小鼠肝臟指數(shù)、肝組織病理變化，測(cè)定各組小鼠血清中炎癥因子的水平及肝臟中脂肪含量，測(cè)定血清轉(zhuǎn)氨酶、肝臟脂肪水平以及肝組織的氧化損傷指標(biāo)丙二醛（MDA）、還原型谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）水平，檢測(cè)核因子E2相關(guān)因子2 （Nrf2）信號(hào)通路重要基因和蛋白Nrf2、NAD（P）H喹啉氧化酶1 （Nqo1）、糖原合成酶激酶-3β （GSK-3β）和非受體酪氨酸蛋白激酶（Fyn）的表達(dá)水平。結(jié)果 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)獲得六棱菊、MAFLD、氧化應(yīng)激的交集靶點(diǎn)共304個(gè)，六棱菊可能通過TNF、AKT1、ALB、EGFR、STAT3、NFE2L2等核心靶點(diǎn)作用于HIF-1、糖尿病并發(fā)癥中的AGE-RAGE、甲狀腺激素、FoxO、PI3K-Akt、TNF信號(hào)通路等發(fā)揮MAFLD治療作用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，模型組小鼠的整體狀態(tài)差，肝臟組織大面積脂肪變性及脂質(zhì)浸潤(rùn)，血清轉(zhuǎn)氨酶、肝臟脂肪水平明顯升高，證實(shí)了高脂飼料飲食喂養(yǎng)8周成功構(gòu)建了小鼠MAFLD模型；各藥物干預(yù)治療組小鼠肝臟指數(shù)、肝臟病理變化和肝臟脂肪水平，血清轉(zhuǎn)氨酶、脂質(zhì)過氧化水平和Nrf2信號(hào)通路重要基因和蛋白表達(dá)均較模型組顯著改變（P＜0.05），其中，六棱菊提取物高劑量組改變最為明顯。結(jié)論 不同劑量六棱菊提取物干預(yù)均能明顯改善MAFLD小鼠血清中炎癥因子水平，肝臟脂質(zhì)沉積、肝功能指標(biāo)，降低肝臟指數(shù)，可能與調(diào)控Nrf2信號(hào)通路的表達(dá)，降低肝組織中脂質(zhì)過氧化水平和炎癥反應(yīng)的表達(dá)有關(guān)。
目的 通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)以及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探討六棱菊對(duì)代謝相關(guān)脂肪性肝?。∕AFLD）模型小鼠的干預(yù)作用及潛在的分子機(jī)制。方法 通過文獻(xiàn)檢索得到六棱菊的活性成分，通過SwissTargetPredicton和疾病數(shù)據(jù)庫(kù)（GeneCards）和PharmMapper數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)六棱菊成分相關(guān)靶標(biāo)，Genecards數(shù)據(jù)庫(kù)獲取MAFLD和氧化應(yīng)激相關(guān)靶標(biāo)，通過STRING和Cytoscape3.9.1軟件建立蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)模型并找到關(guān)鍵靶點(diǎn)。對(duì)六棱菊治療MAFLD的靶標(biāo)進(jìn)行GO富集分析與KEGG通路富集分析。將50只C57BL/6J雄性無菌小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后隨機(jī)分為5組，分別為對(duì)照組、模型組及六棱菊提取物低、中、高劑量（1.25、2.50、5.00 g·kg-1）組；小鼠給予高脂飼料8周進(jìn)行MAFLD造模，造模后給藥6周。實(shí)驗(yàn)第14周末處死小鼠，比較各組小鼠肝臟指數(shù)、肝組織病理變化，測(cè)定各組小鼠血清中炎癥因子的水平及肝臟中脂肪含量，測(cè)定血清轉(zhuǎn)氨酶、肝臟脂肪水平以及肝組織的氧化損傷指標(biāo)丙二醛（MDA）、還原型谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）水平，檢測(cè)核因子E2相關(guān)因子2 （Nrf2）信號(hào)通路重要基因和蛋白Nrf2、NAD（P）H喹啉氧化酶1 （Nqo1）、糖原合成酶激酶-3β （GSK-3β）和非受體酪氨酸蛋白激酶（Fyn）的表達(dá)水平。結(jié)果 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)獲得六棱菊、MAFLD、氧化應(yīng)激的交集靶點(diǎn)共304個(gè)，六棱菊可能通過TNF、AKT1、ALB、EGFR、STAT3、NFE2L2等核心靶點(diǎn)作用于HIF-1、糖尿病并發(fā)癥中的AGE-RAGE、甲狀腺激素、FoxO、PI3K-Akt、TNF信號(hào)通路等發(fā)揮MAFLD治療作用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，模型組小鼠的整體狀態(tài)差，肝臟組織大面積脂肪變性及脂質(zhì)浸潤(rùn)，血清轉(zhuǎn)氨酶、肝臟脂肪水平明顯升高，證實(shí)了高脂飼料飲食喂養(yǎng)8周成功構(gòu)建了小鼠MAFLD模型；各藥物干預(yù)治療組小鼠肝臟指數(shù)、肝臟病理變化和肝臟脂肪水平，血清轉(zhuǎn)氨酶、脂質(zhì)過氧化水平和Nrf2信號(hào)通路重要基因和蛋白表達(dá)均較模型組顯著改變（P＜0.05），其中，六棱菊提取物高劑量組改變最為明顯。結(jié)論 不同劑量六棱菊提取物干預(yù)均能明顯改善MAFLD小鼠血清中炎癥因子水平，肝臟脂質(zhì)沉積、肝功能指標(biāo)，降低肝臟指數(shù)，可能與調(diào)控Nrf2信號(hào)通路的表達(dá)，降低肝組織中脂質(zhì)過氧化水平和炎癥反應(yīng)的表達(dá)有關(guān)。
2024, 47(9):1985-1994.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.005
摘要:
目的 研究梔子抗呼吸道合胞病毒（RSV）作用并預(yù)測(cè)其機(jī)制。方法 通過細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）及實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qRT-PCR）實(shí)驗(yàn)，探索梔子提取物對(duì)RSV的抑制作用；在中藥系統(tǒng)藥理學(xué)分析平臺(tái)（TCMSP）中搜索梔子的活性成分并預(yù)測(cè)其靶點(diǎn)，在GeneCards、OMIM、Disgen數(shù)據(jù)庫(kù)中獲取RSV相關(guān)靶點(diǎn)，獲取藥物-病毒交集基因后構(gòu)建關(guān)鍵蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)，并用分子對(duì)接進(jìn)行驗(yàn)證；交集基因通過DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行基因本體（GO）功能富集分析和基于京都基因與基因組百科全書（KEGG）通路富集分析，預(yù)測(cè)其作用機(jī)制。結(jié)果 梔子提取物半數(shù)細(xì)胞毒性濃度（TC50）為4.621 mg·mL-1，質(zhì)量濃度為3.543 8、1.771 9、0.886 0 mg·mL-1時(shí)有顯著抗RSV作用，且隨質(zhì)量濃度增加，抗RSV作用越強(qiáng)。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)共篩選到梔子有效化合物10個(gè)［口服生物利用度（OB）≥30%，類藥性（DL）＞0.18），可視化結(jié)果顯示有118個(gè)節(jié)點(diǎn)，主要靶點(diǎn)有蛋白激酶Bα （AKT1）、非受體酪氨酸激酶（SRC）、表皮生長(zhǎng)因子（EGFR）等；GO結(jié)果顯示主要與蛋白激酶B信號(hào)的正向調(diào)節(jié)、蛋白質(zhì)磷酸化等生物過程（BP）；質(zhì)膜、大分子復(fù)合物等細(xì)胞組成（CC）； ATP結(jié)合、酶結(jié)合、蛋白激酶活性等分子功能（MF）有關(guān)。KEGG通路富集到117條信號(hào)通路（FDR＜0.01），主要與腫瘤中程序性死亡分子1配體（PD-L1）的表達(dá)和程序性死亡分子1（PD-1）檢查點(diǎn)通路、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K-Akt）、C型凝集素受體（CLRs）等信號(hào)通路有關(guān)。結(jié)論 梔子提取物有顯著抗RSV作用，可能主要以豆甾醇、吡嗪環(huán)辛烯-4a-羧酸、β-谷甾醇、藏紅花酸等成分與EGFR、SRC、絲裂原活化蛋白激酶3（MAPK3）等靶點(diǎn)相結(jié)合，通過PD-L1表達(dá)和PD-1、PI3K-Akt、CLRs通路等信號(hào)通路發(fā)揮抗呼吸道合胞病毒作用。
目的 研究梔子抗呼吸道合胞病毒（RSV）作用并預(yù)測(cè)其機(jī)制。方法 通過細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）及實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qRT-PCR）實(shí)驗(yàn)，探索梔子提取物對(duì)RSV的抑制作用；在中藥系統(tǒng)藥理學(xué)分析平臺(tái)（TCMSP）中搜索梔子的活性成分并預(yù)測(cè)其靶點(diǎn)，在GeneCards、OMIM、Disgen數(shù)據(jù)庫(kù)中獲取RSV相關(guān)靶點(diǎn)，獲取藥物-病毒交集基因后構(gòu)建關(guān)鍵蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)，并用分子對(duì)接進(jìn)行驗(yàn)證；交集基因通過DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行基因本體（GO）功能富集分析和基于京都基因與基因組百科全書（KEGG）通路富集分析，預(yù)測(cè)其作用機(jī)制。結(jié)果 梔子提取物半數(shù)細(xì)胞毒性濃度（TC50）為4.621 mg·mL-1，質(zhì)量濃度為3.543 8、1.771 9、0.886 0 mg·mL-1時(shí)有顯著抗RSV作用，且隨質(zhì)量濃度增加，抗RSV作用越強(qiáng)。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)共篩選到梔子有效化合物10個(gè)［口服生物利用度（OB）≥30%，類藥性（DL）＞0.18），可視化結(jié)果顯示有118個(gè)節(jié)點(diǎn)，主要靶點(diǎn)有蛋白激酶Bα （AKT1）、非受體酪氨酸激酶（SRC）、表皮生長(zhǎng)因子（EGFR）等；GO結(jié)果顯示主要與蛋白激酶B信號(hào)的正向調(diào)節(jié)、蛋白質(zhì)磷酸化等生物過程（BP）；質(zhì)膜、大分子復(fù)合物等細(xì)胞組成（CC）； ATP結(jié)合、酶結(jié)合、蛋白激酶活性等分子功能（MF）有關(guān)。KEGG通路富集到117條信號(hào)通路（FDR＜0.01），主要與腫瘤中程序性死亡分子1配體（PD-L1）的表達(dá)和程序性死亡分子1（PD-1）檢查點(diǎn)通路、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K-Akt）、C型凝集素受體（CLRs）等信號(hào)通路有關(guān)。結(jié)論 梔子提取物有顯著抗RSV作用，可能主要以豆甾醇、吡嗪環(huán)辛烯-4a-羧酸、β-谷甾醇、藏紅花酸等成分與EGFR、SRC、絲裂原活化蛋白激酶3（MAPK3）等靶點(diǎn)相結(jié)合，通過PD-L1表達(dá)和PD-1、PI3K-Akt、CLRs通路等信號(hào)通路發(fā)揮抗呼吸道合胞病毒作用。
2024, 47(9):1995-2005.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.006
摘要:
目的 利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)異甘草酸鎂注射液、甘草酸二銨注射液、復(fù)方甘草酸苷片、甘草酸二銨腸溶膠囊和注射用復(fù)方甘草酸單銨S 5種甘草酸類藥物制劑的心臟保護(hù)作用。方法 利用正常發(fā)育至受精后48 h的心臟熒光轉(zhuǎn)基因斑馬魚作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，將斑馬魚隨機(jī)分為對(duì)照組、陽性對(duì)照組、模型組和不同濃度甘草酸制劑樣品組。在24孔板里分別給予不同濃度樣品、陽性對(duì)照藥物和造模藥物，加培養(yǎng)水至2 mL后，置于（28±5）℃恒溫光照培養(yǎng)箱讓胚胎繼續(xù)發(fā)育。24 h后，用培養(yǎng)水清洗斑馬魚，置于熒光倒置顯微鏡下觀察斑馬魚心律變化并拍照。其中抗心律失常活性的陽性藥為丹紅注射液（9 μL·mL-1），造模藥為特非那定（15 μg·mL-1），統(tǒng)計(jì)斑馬魚1 min的心率及靜脈竇和動(dòng)脈球之間的距離（SV-BA）?？剐乃セ钚缘年栃运帪榈馗咝粒?.1 μg·mL-1），造模藥品為阿霉素（60 μmol·L-1），統(tǒng)計(jì)斑馬魚1 min的心率、心包面積、心室短軸縮短率、每搏輸出量及射血分?jǐn)?shù)。結(jié)果 甘草酸二銨腸溶膠囊、注射用復(fù)方甘草酸單銨S及異甘草酸鎂注射液有較好的抗心律失?；钚裕⑸溆脧?fù)方甘草酸單銨S具有較好的抗心衰活性。結(jié)論 5種甘草酸制劑在抗心律失常和抗心衰方面具有不同程度活性，可為開發(fā)甘草酸類藥物在心臟保護(hù)方面的適應(yīng)癥提供理論依據(jù)。
目的 利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)異甘草酸鎂注射液、甘草酸二銨注射液、復(fù)方甘草酸苷片、甘草酸二銨腸溶膠囊和注射用復(fù)方甘草酸單銨S 5種甘草酸類藥物制劑的心臟保護(hù)作用。方法 利用正常發(fā)育至受精后48 h的心臟熒光轉(zhuǎn)基因斑馬魚作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，將斑馬魚隨機(jī)分為對(duì)照組、陽性對(duì)照組、模型組和不同濃度甘草酸制劑樣品組。在24孔板里分別給予不同濃度樣品、陽性對(duì)照藥物和造模藥物，加培養(yǎng)水至2 mL后，置于（28±5）℃恒溫光照培養(yǎng)箱讓胚胎繼續(xù)發(fā)育。24 h后，用培養(yǎng)水清洗斑馬魚，置于熒光倒置顯微鏡下觀察斑馬魚心律變化并拍照。其中抗心律失常活性的陽性藥為丹紅注射液（9 μL·mL-1），造模藥為特非那定（15 μg·mL-1），統(tǒng)計(jì)斑馬魚1 min的心率及靜脈竇和動(dòng)脈球之間的距離（SV-BA）?？剐乃セ钚缘年栃运帪榈馗咝粒?.1 μg·mL-1），造模藥品為阿霉素（60 μmol·L-1），統(tǒng)計(jì)斑馬魚1 min的心率、心包面積、心室短軸縮短率、每搏輸出量及射血分?jǐn)?shù)。結(jié)果 甘草酸二銨腸溶膠囊、注射用復(fù)方甘草酸單銨S及異甘草酸鎂注射液有較好的抗心律失?；钚裕⑸溆脧?fù)方甘草酸單銨S具有較好的抗心衰活性。結(jié)論 5種甘草酸制劑在抗心律失常和抗心衰方面具有不同程度活性，可為開發(fā)甘草酸類藥物在心臟保護(hù)方面的適應(yīng)癥提供理論依據(jù)。
2024, 47(9):2006-2016.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.007
摘要:
目的 基于陽離子脂質(zhì)體制備血管細(xì)胞黏附分子-1（VCAM-1）單克隆抗體（VCAM-1 mAb）修飾的負(fù)載微小RNA-126（miR-126）的靶向遞送系統(tǒng)，并初步評(píng)價(jià)其穩(wěn)定性、細(xì)胞毒性及細(xì)胞攝取。方法 采用薄膜分散-擠出法制備硬脂胺陽離子脂質(zhì)體（SCL），以脂質(zhì)體粒徑、電位為指標(biāo)，單因素法考察大豆磷脂與膽固醇質(zhì)量比、硬脂胺用量、無水乙醇的用量、成膜溫度、水合介質(zhì)用量、水合制備溫度、水合制備時(shí)間；并考察其稀釋穩(wěn)定性及儲(chǔ)存穩(wěn)定性。采用瓊脂糖凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)考察SCL對(duì)miR-126的負(fù)載能力及對(duì)酶解的保護(hù)效果。利用1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亞胺鹽酸鹽（EDC）/N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）交聯(lián)法制備VCAM-1 mAb修飾的SCL（Va-SCL），并通過SDS-PAGE法考察VCAM-1 mAb與SCL的耦連效率。MTT法考察其對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）的毒性，流式細(xì)胞術(shù)和熒光顯微鏡考察正常HUVECs及LPS（1 μg·mL-1）刺激后HUVECs對(duì)miR-126、SCL/miR-126、Va-SCL/miR-126的攝取情況。結(jié)果 精密稱量大豆磷脂120 mg、膽固醇40 mg、硬脂胺10 mg于茄形瓶中，加入5 mL無水乙醇，50℃超聲（功率300 W、頻率40 kHz）使其充分溶解，肉眼觀察無可見顆粒物或者不溶物，水浴減壓蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，在瓶壁上形成均勻透明的脂質(zhì)薄膜；加入12 mL DEPC水作為水合介質(zhì)，水浴超聲30 min，擠出器過孔徑為200 nm聚碳酸酯膜7次，取續(xù)濾液，得SCL，穩(wěn)定性良好。當(dāng)?shù)妆葹?0∶1時(shí)，SCL能夠有效負(fù)載miR-126；miR-126通過靜電吸附于SCL表面，SCL一定程度上保護(hù)miR-126不被酶解。SDS-PAGE結(jié)果顯示，VCAM-1mAb與SCL成功偶聯(lián)，接枝率為（53.2±7.6）%。MTT結(jié)果顯示，Va-SCL、Va-SCL/miR-126對(duì)HUVECs的半數(shù)抑制濃度（IC50）值分別為17.38、71.61 nmol·L-1，SCL、SCL/miR-126的IC50值分別為81.03、97.79 nmol·L-1。熒光顯微鏡及流式結(jié)果均顯示Va-SCL/miR-126的細(xì)胞攝取效果更為明顯。結(jié)論 成功制備了Va-SCL/miR-126，能明顯增加miR-126的細(xì)胞攝取。
目的 基于陽離子脂質(zhì)體制備血管細(xì)胞黏附分子-1（VCAM-1）單克隆抗體（VCAM-1 mAb）修飾的負(fù)載微小RNA-126（miR-126）的靶向遞送系統(tǒng)，并初步評(píng)價(jià)其穩(wěn)定性、細(xì)胞毒性及細(xì)胞攝取。方法 采用薄膜分散-擠出法制備硬脂胺陽離子脂質(zhì)體（SCL），以脂質(zhì)體粒徑、電位為指標(biāo)，單因素法考察大豆磷脂與膽固醇質(zhì)量比、硬脂胺用量、無水乙醇的用量、成膜溫度、水合介質(zhì)用量、水合制備溫度、水合制備時(shí)間；并考察其稀釋穩(wěn)定性及儲(chǔ)存穩(wěn)定性。采用瓊脂糖凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)考察SCL對(duì)miR-126的負(fù)載能力及對(duì)酶解的保護(hù)效果。利用1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亞胺鹽酸鹽（EDC）/N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）交聯(lián)法制備VCAM-1 mAb修飾的SCL（Va-SCL），并通過SDS-PAGE法考察VCAM-1 mAb與SCL的耦連效率。MTT法考察其對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）的毒性，流式細(xì)胞術(shù)和熒光顯微鏡考察正常HUVECs及LPS（1 μg·mL-1）刺激后HUVECs對(duì)miR-126、SCL/miR-126、Va-SCL/miR-126的攝取情況。結(jié)果 精密稱量大豆磷脂120 mg、膽固醇40 mg、硬脂胺10 mg于茄形瓶中，加入5 mL無水乙醇，50℃超聲（功率300 W、頻率40 kHz）使其充分溶解，肉眼觀察無可見顆粒物或者不溶物，水浴減壓蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，在瓶壁上形成均勻透明的脂質(zhì)薄膜；加入12 mL DEPC水作為水合介質(zhì)，水浴超聲30 min，擠出器過孔徑為200 nm聚碳酸酯膜7次，取續(xù)濾液，得SCL，穩(wěn)定性良好。當(dāng)?shù)妆葹?0∶1時(shí)，SCL能夠有效負(fù)載miR-126；miR-126通過靜電吸附于SCL表面，SCL一定程度上保護(hù)miR-126不被酶解。SDS-PAGE結(jié)果顯示，VCAM-1mAb與SCL成功偶聯(lián)，接枝率為（53.2±7.6）%。MTT結(jié)果顯示，Va-SCL、Va-SCL/miR-126對(duì)HUVECs的半數(shù)抑制濃度（IC50）值分別為17.38、71.61 nmol·L-1，SCL、SCL/miR-126的IC50值分別為81.03、97.79 nmol·L-1。熒光顯微鏡及流式結(jié)果均顯示Va-SCL/miR-126的細(xì)胞攝取效果更為明顯。結(jié)論 成功制備了Va-SCL/miR-126，能明顯增加miR-126的細(xì)胞攝取。
2024, 47(9):2017-2025.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.008
摘要:
目的 通過氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）技術(shù)對(duì)經(jīng)典名方當(dāng)歸補(bǔ)血湯在飲片、基準(zhǔn)樣品、提取液、濃縮液、浸膏粉及顆粒中的揮發(fā)性成分進(jìn)行檢測(cè)，建立多指標(biāo)成分含量測(cè)定方法，探究其量值傳遞規(guī)律。方法 采用GC-MS技術(shù)對(duì)當(dāng)歸補(bǔ)血湯基準(zhǔn)樣品中揮發(fā)性成分進(jìn)行指認(rèn)，判定其成分歸屬，借助NIST 20s.lib數(shù)據(jù)庫(kù)及對(duì)照品比對(duì)篩選出共有成分，建立共有成分的GC-MS含量測(cè)定方法，探究其在飲片-基準(zhǔn)樣品、飲片-提取液、提取液-濃縮液、濃縮液-浸膏粉、浸膏粉-顆粒中的量值傳遞規(guī)律。結(jié)果 當(dāng)歸補(bǔ)血湯基準(zhǔn)樣品中共檢出10個(gè)響應(yīng)較好的成分，其中2個(gè)來自黃芪，8個(gè)來自酒當(dāng)歸，篩選出苯甲酸、2-甲氧基-4-乙烯基苯酚、藁本內(nèi)酯、洋川芎內(nèi)酯H 4個(gè)共有成分。含量測(cè)定結(jié)果表明此4個(gè)成分從飲片到顆粒得到有效傳遞，且苯甲酸、2-甲氧基-4-乙烯基苯酚和洋川芎內(nèi)酯H在顆粒的轉(zhuǎn)移率與基準(zhǔn)樣品較接近，而藁本內(nèi)酯在濃縮和噴干工藝中損失較多，導(dǎo)致轉(zhuǎn)移率相差較大。結(jié)論 從飲片到顆粒的傳遞過程中，不同揮發(fā)性成分的傳遞規(guī)律不一致，有必要優(yōu)選合適生產(chǎn)工藝保留揮發(fā)性成分，并選擇合理評(píng)價(jià)指標(biāo)進(jìn)行質(zhì)量控制。
目的 通過氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）技術(shù)對(duì)經(jīng)典名方當(dāng)歸補(bǔ)血湯在飲片、基準(zhǔn)樣品、提取液、濃縮液、浸膏粉及顆粒中的揮發(fā)性成分進(jìn)行檢測(cè)，建立多指標(biāo)成分含量測(cè)定方法，探究其量值傳遞規(guī)律。方法 采用GC-MS技術(shù)對(duì)當(dāng)歸補(bǔ)血湯基準(zhǔn)樣品中揮發(fā)性成分進(jìn)行指認(rèn)，判定其成分歸屬，借助NIST 20s.lib數(shù)據(jù)庫(kù)及對(duì)照品比對(duì)篩選出共有成分，建立共有成分的GC-MS含量測(cè)定方法，探究其在飲片-基準(zhǔn)樣品、飲片-提取液、提取液-濃縮液、濃縮液-浸膏粉、浸膏粉-顆粒中的量值傳遞規(guī)律。結(jié)果 當(dāng)歸補(bǔ)血湯基準(zhǔn)樣品中共檢出10個(gè)響應(yīng)較好的成分，其中2個(gè)來自黃芪，8個(gè)來自酒當(dāng)歸，篩選出苯甲酸、2-甲氧基-4-乙烯基苯酚、藁本內(nèi)酯、洋川芎內(nèi)酯H 4個(gè)共有成分。含量測(cè)定結(jié)果表明此4個(gè)成分從飲片到顆粒得到有效傳遞，且苯甲酸、2-甲氧基-4-乙烯基苯酚和洋川芎內(nèi)酯H在顆粒的轉(zhuǎn)移率與基準(zhǔn)樣品較接近，而藁本內(nèi)酯在濃縮和噴干工藝中損失較多，導(dǎo)致轉(zhuǎn)移率相差較大。結(jié)論 從飲片到顆粒的傳遞過程中，不同揮發(fā)性成分的傳遞規(guī)律不一致，有必要優(yōu)選合適生產(chǎn)工藝保留揮發(fā)性成分，并選擇合理評(píng)價(jià)指標(biāo)進(jìn)行質(zhì)量控制。
2024, 47(9):2026-2031.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.009
摘要:
目的 建立臨床前毒理學(xué)研究中能充分涵蓋正常恒河猴眼球解剖組織學(xué)結(jié)構(gòu)和恒河猴眼球?qū)嵤┊惙N角膜內(nèi)皮植片移植后包含角膜及異種角膜內(nèi)皮植片的一致性組織制片方法。方法 成年恒河猴10只為對(duì)照組，10只為模型組，模型組右眼實(shí)施異種角膜內(nèi)皮植片移植手術(shù)。動(dòng)物剖檢時(shí)，摘取眼球，采用Davidson's液固定。左側(cè)正常眼球：在平行于顳側(cè)睫狀后長(zhǎng)動(dòng)脈及視神經(jīng)上方1 mm處，使用取材刀片沿視神經(jīng)、黃斑（中心凹）與角膜作一切面，切片經(jīng)常規(guī)脫水、包埋、切片、染色后進(jìn)行鏡檢。右側(cè)眼球：從睫狀體后方切取角膜及虹膜，摘除晶狀體，然后使角膜面向上，間隔2.5 mm切取角膜及虹膜，將切取的組織以切面向下按順序放入分格包埋盒中，剩余眼球組織再切3個(gè)橫切面并放入包埋盒，然后組織經(jīng)脫水、包埋、切片和HE染色及Masson染色，最后對(duì)正常眼球、角膜及異種角膜內(nèi)皮植片的解剖及組織學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)進(jìn)行確認(rèn)。結(jié)果 所制備的正常眼球切片可清晰顯示眼球所有組織結(jié)構(gòu)，染色鮮艷，眼球形態(tài)真實(shí)。實(shí)施異種角膜內(nèi)皮植片移植后，眼球角膜及異種角膜內(nèi)皮植片結(jié)構(gòu)清晰，且能良好地展示異種角膜內(nèi)皮植片與角膜的貼合狀態(tài)。所制備的組織切片表面平整，未見人工假象。結(jié)論 通過自主建立的制片方法，可獲得包含所有眼球組織結(jié)構(gòu)特征的正常眼球切片，以及包含完整角膜、異種角膜內(nèi)皮植片及眼球其他組織的良好切片。所建立的眼球制片方法簡(jiǎn)單易行，并且一致性較高，可用于臨床前毒理學(xué)研究中眼部用藥及實(shí)施異種角膜內(nèi)皮植片移植后眼部的病理學(xué)評(píng)價(jià)。
目的 建立臨床前毒理學(xué)研究中能充分涵蓋正常恒河猴眼球解剖組織學(xué)結(jié)構(gòu)和恒河猴眼球?qū)嵤┊惙N角膜內(nèi)皮植片移植后包含角膜及異種角膜內(nèi)皮植片的一致性組織制片方法。方法 成年恒河猴10只為對(duì)照組，10只為模型組，模型組右眼實(shí)施異種角膜內(nèi)皮植片移植手術(shù)。動(dòng)物剖檢時(shí)，摘取眼球，采用Davidson's液固定。左側(cè)正常眼球：在平行于顳側(cè)睫狀后長(zhǎng)動(dòng)脈及視神經(jīng)上方1 mm處，使用取材刀片沿視神經(jīng)、黃斑（中心凹）與角膜作一切面，切片經(jīng)常規(guī)脫水、包埋、切片、染色后進(jìn)行鏡檢。右側(cè)眼球：從睫狀體后方切取角膜及虹膜，摘除晶狀體，然后使角膜面向上，間隔2.5 mm切取角膜及虹膜，將切取的組織以切面向下按順序放入分格包埋盒中，剩余眼球組織再切3個(gè)橫切面并放入包埋盒，然后組織經(jīng)脫水、包埋、切片和HE染色及Masson染色，最后對(duì)正常眼球、角膜及異種角膜內(nèi)皮植片的解剖及組織學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)進(jìn)行確認(rèn)。結(jié)果 所制備的正常眼球切片可清晰顯示眼球所有組織結(jié)構(gòu)，染色鮮艷，眼球形態(tài)真實(shí)。實(shí)施異種角膜內(nèi)皮植片移植后，眼球角膜及異種角膜內(nèi)皮植片結(jié)構(gòu)清晰，且能良好地展示異種角膜內(nèi)皮植片與角膜的貼合狀態(tài)。所制備的組織切片表面平整，未見人工假象。結(jié)論 通過自主建立的制片方法，可獲得包含所有眼球組織結(jié)構(gòu)特征的正常眼球切片，以及包含完整角膜、異種角膜內(nèi)皮植片及眼球其他組織的良好切片。所建立的眼球制片方法簡(jiǎn)單易行，并且一致性較高，可用于臨床前毒理學(xué)研究中眼部用藥及實(shí)施異種角膜內(nèi)皮植片移植后眼部的病理學(xué)評(píng)價(jià)。
2024, 47(9):2032-2040.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.010
摘要:
目的 探討脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體（ADSCs-Exos）對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥細(xì)胞（12Z）增殖以及纖維化相關(guān)因子表達(dá)的影響。方法 采用超速離心法提取ADSCs-Exos，并通過透射電鏡（TEM）、納米顆粒跟蹤分析（NTA）、Western blotting鑒定；采用PKH26標(biāo)記外泌體法觀察12Z細(xì)胞對(duì)外泌體的吞噬內(nèi)化情況；采用CCK-8法檢測(cè)ADSCs-Exos （12.5、25.0、50.0 μg·mL-1）對(duì)12Z細(xì)胞增殖的影響；將12Z細(xì)胞分為：對(duì)照組、模型組、ADSCs-Exos（12.5、25.0、50.0 μg·mL-1）組，除對(duì)照組外，其余各組采用TGF-β1（5 ng·mL-1）誘導(dǎo)細(xì)胞纖維化，給藥24 h后采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qRT-PCR）檢測(cè)纖維化因子基因mRNA的表達(dá)。結(jié)果 提取的ADSCs-Exos呈現(xiàn)圓形顆粒，清晰可見；總萃取物的平均粒徑為122.6 nm，濃度為1.8×106顆粒·mL-1；CD9、CD63和TSG101在ADSCs-Exos均有表達(dá)，且Calnexin蛋白未表達(dá)，符合外泌體的特征。12Z細(xì)胞可以成功將ADSCs-Exos吞噬內(nèi)化；CCK-8檢測(cè)結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，采用25 μg·mL-1 ADSCs-Exos干預(yù)24 h后12Z細(xì)胞的相對(duì)存活率顯著降低（P＜0.01）。qRT-PCR結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，模型組細(xì)胞的CTGF、COL1A1、α-SMAmRNA表達(dá)水平顯著升高（P＜0.001）；與模型組比較，12.5、25.0 μg·mL-1 ADSCs-Exos組CTGF、COL1A1、α-SMA mRNA表達(dá)水平降低（P＜0.05、0.01、0.001）；50.0 μg·mL-1 ADSCs-Exos組α-SMA mRNA表達(dá)水平明顯降低（P＜0.001）。結(jié)論 ADSCs-Exos可被12Z細(xì)胞所吞噬，抑制12Z細(xì)胞的增殖，并且降低細(xì)胞纖維化相關(guān)因子基因的表達(dá)水平。
目的 探討脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體（ADSCs-Exos）對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥細(xì)胞（12Z）增殖以及纖維化相關(guān)因子表達(dá)的影響。方法 采用超速離心法提取ADSCs-Exos，并通過透射電鏡（TEM）、納米顆粒跟蹤分析（NTA）、Western blotting鑒定；采用PKH26標(biāo)記外泌體法觀察12Z細(xì)胞對(duì)外泌體的吞噬內(nèi)化情況；采用CCK-8法檢測(cè)ADSCs-Exos （12.5、25.0、50.0 μg·mL-1）對(duì)12Z細(xì)胞增殖的影響；將12Z細(xì)胞分為：對(duì)照組、模型組、ADSCs-Exos（12.5、25.0、50.0 μg·mL-1）組，除對(duì)照組外，其余各組采用TGF-β1（5 ng·mL-1）誘導(dǎo)細(xì)胞纖維化，給藥24 h后采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qRT-PCR）檢測(cè)纖維化因子基因mRNA的表達(dá)。結(jié)果 提取的ADSCs-Exos呈現(xiàn)圓形顆粒，清晰可見；總萃取物的平均粒徑為122.6 nm，濃度為1.8×106顆粒·mL-1；CD9、CD63和TSG101在ADSCs-Exos均有表達(dá)，且Calnexin蛋白未表達(dá)，符合外泌體的特征。12Z細(xì)胞可以成功將ADSCs-Exos吞噬內(nèi)化；CCK-8檢測(cè)結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，采用25 μg·mL-1 ADSCs-Exos干預(yù)24 h后12Z細(xì)胞的相對(duì)存活率顯著降低（P＜0.01）。qRT-PCR結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，模型組細(xì)胞的CTGF、COL1A1、α-SMAmRNA表達(dá)水平顯著升高（P＜0.001）；與模型組比較，12.5、25.0 μg·mL-1 ADSCs-Exos組CTGF、COL1A1、α-SMA mRNA表達(dá)水平降低（P＜0.05、0.01、0.001）；50.0 μg·mL-1 ADSCs-Exos組α-SMA mRNA表達(dá)水平明顯降低（P＜0.001）。結(jié)論 ADSCs-Exos可被12Z細(xì)胞所吞噬，抑制12Z細(xì)胞的增殖，并且降低細(xì)胞纖維化相關(guān)因子基因的表達(dá)水平。
2024, 47(9):2041-2048.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.011
摘要:
目的 探究梓醇調(diào)節(jié)Hedgehog通路對(duì)早發(fā)性卵巢功能不全（POI）大鼠的卵巢保護(hù)作用。方法 將大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組，模型組，梓醇低、高劑量（30、60 mg·kg-1）組，梓醇（60 mg·kg-1）＋GANT-61（40 mg·kg-1，Hedgehog通路抑制劑）組，除對(duì)照組外，每天ig 1次50 mg·kg-1的雷公藤多苷混懸液，連續(xù)14 d，制備POI模型，模型成功后每天ip給藥1次，連續(xù)給藥4周。取卵巢組織計(jì)算大鼠卵巢指數(shù)；ELISA測(cè)定血清激素雌二醇（E2）、黃體生成素（LH）和卵泡刺激素（FSH）水平；試劑盒檢測(cè)卵巢組織中活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和過氧化物酶（CAT）水平；HE染色觀察卵巢組織結(jié)構(gòu)并進(jìn)行卵泡計(jì)數(shù)；TUNEL檢測(cè)卵巢組織細(xì)胞凋亡情況；Western blotting檢測(cè)卵巢組織cleaved Caspase-3、Bax、Bcl-2、Shh、Gli1蛋白表達(dá)。結(jié)果 與對(duì)照組比較，模型組大鼠卵巢組織形態(tài)明顯損傷，卵巢指數(shù)、血清E2水平、卵巢組織中SOD和CAT水平、生長(zhǎng)卵泡數(shù)量、Bcl-2、Shh、Gli1蛋白表達(dá)水平顯著降低（P＜0.05），血清FSH和LH水平、卵巢組織中ROS和MDA水平、閉鎖卵泡數(shù)量、細(xì)胞凋亡率、cleaved Caspase-3和Bax蛋白表達(dá)水平顯著升高（P＜0.05）；與模型組相比，梓醇30、60 mg·kg-1組大鼠卵巢組織形態(tài)損傷明顯減輕，卵巢指數(shù)、血清E2水平、卵巢組織中SOD和CAT水平、生長(zhǎng)卵泡數(shù)量、Bcl-2、Shh、Gli1蛋白表達(dá)水平顯著升高（P＜0.05），血清FSH和LH水平、卵巢組織中ROS和MDA水平、閉鎖卵泡數(shù)量、細(xì)胞凋亡率、cleaved Caspase-3和Bax蛋白表達(dá)水平顯著降低（P＜0.05）；GANT-61可減輕梓醇對(duì)POI大鼠卵巢的保護(hù)作用（P＜0.05）。結(jié)論 梓醇可降低POI大鼠卵巢組織氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡，調(diào)控血清激素水平，進(jìn)而改善卵巢功能，可能是通過激活Hedgehog通路實(shí)現(xiàn)的。
目的 探究梓醇調(diào)節(jié)Hedgehog通路對(duì)早發(fā)性卵巢功能不全（POI）大鼠的卵巢保護(hù)作用。方法 將大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組，模型組，梓醇低、高劑量（30、60 mg·kg-1）組，梓醇（60 mg·kg-1）＋GANT-61（40 mg·kg-1，Hedgehog通路抑制劑）組，除對(duì)照組外，每天ig 1次50 mg·kg-1的雷公藤多苷混懸液，連續(xù)14 d，制備POI模型，模型成功后每天ip給藥1次，連續(xù)給藥4周。取卵巢組織計(jì)算大鼠卵巢指數(shù)；ELISA測(cè)定血清激素雌二醇（E2）、黃體生成素（LH）和卵泡刺激素（FSH）水平；試劑盒檢測(cè)卵巢組織中活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和過氧化物酶（CAT）水平；HE染色觀察卵巢組織結(jié)構(gòu)并進(jìn)行卵泡計(jì)數(shù)；TUNEL檢測(cè)卵巢組織細(xì)胞凋亡情況；Western blotting檢測(cè)卵巢組織cleaved Caspase-3、Bax、Bcl-2、Shh、Gli1蛋白表達(dá)。結(jié)果 與對(duì)照組比較，模型組大鼠卵巢組織形態(tài)明顯損傷，卵巢指數(shù)、血清E2水平、卵巢組織中SOD和CAT水平、生長(zhǎng)卵泡數(shù)量、Bcl-2、Shh、Gli1蛋白表達(dá)水平顯著降低（P＜0.05），血清FSH和LH水平、卵巢組織中ROS和MDA水平、閉鎖卵泡數(shù)量、細(xì)胞凋亡率、cleaved Caspase-3和Bax蛋白表達(dá)水平顯著升高（P＜0.05）；與模型組相比，梓醇30、60 mg·kg-1組大鼠卵巢組織形態(tài)損傷明顯減輕，卵巢指數(shù)、血清E2水平、卵巢組織中SOD和CAT水平、生長(zhǎng)卵泡數(shù)量、Bcl-2、Shh、Gli1蛋白表達(dá)水平顯著升高（P＜0.05），血清FSH和LH水平、卵巢組織中ROS和MDA水平、閉鎖卵泡數(shù)量、細(xì)胞凋亡率、cleaved Caspase-3和Bax蛋白表達(dá)水平顯著降低（P＜0.05）；GANT-61可減輕梓醇對(duì)POI大鼠卵巢的保護(hù)作用（P＜0.05）。結(jié)論 梓醇可降低POI大鼠卵巢組織氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡，調(diào)控血清激素水平，進(jìn)而改善卵巢功能，可能是通過激活Hedgehog通路實(shí)現(xiàn)的。
2024, 47(9):2049-2057.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.012
摘要:
目的 探究光甘草定（GLA）對(duì)食管癌細(xì)胞增殖、凋亡、侵襲、遷移的影響并分析其是否與調(diào)節(jié)Janus蛋白酪氨酸激酶2（JAK2）/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3（STAT3）通路有關(guān)。方法 MTT法檢測(cè)0、10、20、40、80、160、320 μmol·L-1GLA對(duì)人食管癌細(xì)胞KYSE150存活率的影響，并計(jì)算半數(shù)抑制濃度（IC50）。確定80、40、20 μmol·L-1為后續(xù)實(shí)驗(yàn)GLA濃度，并設(shè)置對(duì)照組、GLA（80 μmol·L-1）＋Colivelin（0.5 μmol·L-1，JAK2/STAT3通路激活劑）組、GLA（80 μmol·L-1）＋baricitini （10 μmol·L-1，JAK2抑制劑）組，CCK8法檢測(cè)細(xì)胞活力，集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞克隆能力，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡，Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲，傷口愈合實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移，Westren blotting法檢測(cè)JAK2/STAT3通路及增殖、遷移蛋白表達(dá)。建立食管癌裸鼠模型，隨機(jī)分為模型組和GLA（50 mg·kg-1）組，每天ig給藥1次，治療3周后處死小鼠，分析腫瘤質(zhì)量、體積，免疫組化染色分析組織中JAK2、STAT3陽性表達(dá)。結(jié)果 與對(duì)照組比較，GLA組凋亡率顯著升高（P＜0.05），細(xì)胞活力、細(xì)胞克隆數(shù)、侵襲數(shù)、遷移率顯著降低（P＜0.05）。與GLA 80 μmol·L-1組比較，GLA＋Colivelin組凋亡率顯著降低（P＜0.05），細(xì)胞活力、細(xì)胞克隆數(shù)、侵襲數(shù)、遷移率顯著升高（P＜0.05）；GLA＋baricitini組細(xì)胞凋亡率顯著升高（P＜0.05），活力、細(xì)胞克隆數(shù)、侵襲數(shù)、遷移率顯著降低（P＜0.05）。與對(duì)照組比較，GLA組細(xì)胞Bax蛋白表達(dá)顯著升高（P＜0.05），p-JAK2、p-STAT3、c-MYC、Ki67、基質(zhì)金屬蛋白酶9 （MMP-9）表達(dá)顯著降低（P＜0.05）。與GLA 80 μmol·L-1組比較，GLA＋Colivelin組Bax蛋白表達(dá)顯著降低（P＜0.05），p-JAK2、p-STAT3、c-MYC、Ki67、MMP-9蛋白表達(dá)顯著升高（P＜0.05）；GLA＋baricitini組Bax蛋白表達(dá)顯著升高（P＜0.05），p-JAK2、p-STAT3、c-MYC、Ki67、MMP-9蛋白表達(dá)顯著降低（P＜0.05）。與模型組裸鼠比較，GLA組腫瘤質(zhì)量和體積顯著降低（P＜0.05），JAK2、STAT3陽性表達(dá)率顯著降低（P＜0.05）。結(jié)論 GLA可能抑制JAK2/STAT3通路，進(jìn)而抑制食管癌細(xì)胞增殖、侵襲、遷移，并促進(jìn)凋亡。
目的 探究光甘草定（GLA）對(duì)食管癌細(xì)胞增殖、凋亡、侵襲、遷移的影響并分析其是否與調(diào)節(jié)Janus蛋白酪氨酸激酶2（JAK2）/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3（STAT3）通路有關(guān)。方法 MTT法檢測(cè)0、10、20、40、80、160、320 μmol·L-1GLA對(duì)人食管癌細(xì)胞KYSE150存活率的影響，并計(jì)算半數(shù)抑制濃度（IC50）。確定80、40、20 μmol·L-1為后續(xù)實(shí)驗(yàn)GLA濃度，并設(shè)置對(duì)照組、GLA（80 μmol·L-1）＋Colivelin（0.5 μmol·L-1，JAK2/STAT3通路激活劑）組、GLA（80 μmol·L-1）＋baricitini （10 μmol·L-1，JAK2抑制劑）組，CCK8法檢測(cè)細(xì)胞活力，集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞克隆能力，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡，Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲，傷口愈合實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移，Westren blotting法檢測(cè)JAK2/STAT3通路及增殖、遷移蛋白表達(dá)。建立食管癌裸鼠模型，隨機(jī)分為模型組和GLA（50 mg·kg-1）組，每天ig給藥1次，治療3周后處死小鼠，分析腫瘤質(zhì)量、體積，免疫組化染色分析組織中JAK2、STAT3陽性表達(dá)。結(jié)果 與對(duì)照組比較，GLA組凋亡率顯著升高（P＜0.05），細(xì)胞活力、細(xì)胞克隆數(shù)、侵襲數(shù)、遷移率顯著降低（P＜0.05）。與GLA 80 μmol·L-1組比較，GLA＋Colivelin組凋亡率顯著降低（P＜0.05），細(xì)胞活力、細(xì)胞克隆數(shù)、侵襲數(shù)、遷移率顯著升高（P＜0.05）；GLA＋baricitini組細(xì)胞凋亡率顯著升高（P＜0.05），活力、細(xì)胞克隆數(shù)、侵襲數(shù)、遷移率顯著降低（P＜0.05）。與對(duì)照組比較，GLA組細(xì)胞Bax蛋白表達(dá)顯著升高（P＜0.05），p-JAK2、p-STAT3、c-MYC、Ki67、基質(zhì)金屬蛋白酶9 （MMP-9）表達(dá)顯著降低（P＜0.05）。與GLA 80 μmol·L-1組比較，GLA＋Colivelin組Bax蛋白表達(dá)顯著降低（P＜0.05），p-JAK2、p-STAT3、c-MYC、Ki67、MMP-9蛋白表達(dá)顯著升高（P＜0.05）；GLA＋baricitini組Bax蛋白表達(dá)顯著升高（P＜0.05），p-JAK2、p-STAT3、c-MYC、Ki67、MMP-9蛋白表達(dá)顯著降低（P＜0.05）。與模型組裸鼠比較，GLA組腫瘤質(zhì)量和體積顯著降低（P＜0.05），JAK2、STAT3陽性表達(dá)率顯著降低（P＜0.05）。結(jié)論 GLA可能抑制JAK2/STAT3通路，進(jìn)而抑制食管癌細(xì)胞增殖、侵襲、遷移，并促進(jìn)凋亡。
2024, 47(9):2058-2066.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.013
摘要:
目的 運(yùn)用微流控技術(shù)制備天麻素（GAS）多囊脂質(zhì)體（GAS-MVLs），考察GAS-MVLs在小鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)及腦靶向性。方法 以成形性為評(píng)價(jià)指標(biāo)，通過單因素實(shí)驗(yàn)篩選GAS-MVLs成形工藝；以包封率為指標(biāo)，以藥脂比（GAS∶卵磷脂）、醇脂比（膽固醇∶卵磷脂）、卵磷脂與三油酸甘油酯的質(zhì)量比、聚山梨酯80的質(zhì)量濃度為變量，正交試驗(yàn)優(yōu)化GAS-MVLs處方；對(duì)GAS-MVLs進(jìn)行包封率、粒徑、聚合物分散性指數(shù)（PDI）、形態(tài)進(jìn)行表征，進(jìn)行體外累積釋放率及初步穩(wěn)定性試驗(yàn)。采用HPLC法測(cè)定小鼠給予GAS、GAS-MVLs（30 mg·kg-1）后5、15、30、60、90、120、150、180、240、300 min血漿及腦組織中GAS的濃度，以相對(duì)攝取率（Re）、靶向效率（Te）及腦內(nèi)峰濃度比（Ce）評(píng)價(jià)GAS-MVLs腦靶向性。結(jié)果 優(yōu)化處方為藥脂比為1∶2，醇脂比為1∶1，卵磷脂與三油酸甘油酯為1∶1.5，聚山梨酯80質(zhì)量濃度為6%。精密稱取處方量的卵磷脂、膽固醇、三油酸甘油酯溶于氯仿-乙醚（2∶1）混合溶劑為脂相，精密稱取GAS溶于水作為內(nèi)水相，內(nèi)水相與脂相體積比為2∶3，將內(nèi)水相加入到脂相中，在冰水浴下超聲3 min，形成初乳；以6%聚山梨酯80為外水相，與初乳從不同入口注入微流控裝置中，通過Y型芯片，設(shè)置總體積流量（18.78 mL·h-1）和體積流量比（外水相∶初乳＝23∶1），經(jīng)氮?dú)馊コ袡C(jī)溶劑，得GAS-MVLs。GAS-MVLs平均粒徑為（2.09±0.14） μm，PDI為0.258±0.013，平均包封率為（34.47±0.39）%，分布均勻，形態(tài)圓整，結(jié)構(gòu)致密。GAS在溶出介質(zhì)中迅速溶解，6 h的釋放量接近90%；GAS-MVLs在前6 h釋放速度較快，隨后接近平衡，72 h最大累積釋放率在65%左右。穩(wěn)定性試驗(yàn)中GAS-MVLs的平均粒徑緩慢增大，包封率緩慢下降。藥動(dòng)學(xué)試驗(yàn)Re為5.70、Te為0.37、Ce為2.04。結(jié)論 采用微流控技術(shù)成功制備GAS-MVLs，可顯著提高GAS的腦內(nèi)富集程度。
目的 運(yùn)用微流控技術(shù)制備天麻素（GAS）多囊脂質(zhì)體（GAS-MVLs），考察GAS-MVLs在小鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)及腦靶向性。方法 以成形性為評(píng)價(jià)指標(biāo)，通過單因素實(shí)驗(yàn)篩選GAS-MVLs成形工藝；以包封率為指標(biāo)，以藥脂比（GAS∶卵磷脂）、醇脂比（膽固醇∶卵磷脂）、卵磷脂與三油酸甘油酯的質(zhì)量比、聚山梨酯80的質(zhì)量濃度為變量，正交試驗(yàn)優(yōu)化GAS-MVLs處方；對(duì)GAS-MVLs進(jìn)行包封率、粒徑、聚合物分散性指數(shù)（PDI）、形態(tài)進(jìn)行表征，進(jìn)行體外累積釋放率及初步穩(wěn)定性試驗(yàn)。采用HPLC法測(cè)定小鼠給予GAS、GAS-MVLs（30 mg·kg-1）后5、15、30、60、90、120、150、180、240、300 min血漿及腦組織中GAS的濃度，以相對(duì)攝取率（Re）、靶向效率（Te）及腦內(nèi)峰濃度比（Ce）評(píng)價(jià)GAS-MVLs腦靶向性。結(jié)果 優(yōu)化處方為藥脂比為1∶2，醇脂比為1∶1，卵磷脂與三油酸甘油酯為1∶1.5，聚山梨酯80質(zhì)量濃度為6%。精密稱取處方量的卵磷脂、膽固醇、三油酸甘油酯溶于氯仿-乙醚（2∶1）混合溶劑為脂相，精密稱取GAS溶于水作為內(nèi)水相，內(nèi)水相與脂相體積比為2∶3，將內(nèi)水相加入到脂相中，在冰水浴下超聲3 min，形成初乳；以6%聚山梨酯80為外水相，與初乳從不同入口注入微流控裝置中，通過Y型芯片，設(shè)置總體積流量（18.78 mL·h-1）和體積流量比（外水相∶初乳＝23∶1），經(jīng)氮?dú)馊コ袡C(jī)溶劑，得GAS-MVLs。GAS-MVLs平均粒徑為（2.09±0.14） μm，PDI為0.258±0.013，平均包封率為（34.47±0.39）%，分布均勻，形態(tài)圓整，結(jié)構(gòu)致密。GAS在溶出介質(zhì)中迅速溶解，6 h的釋放量接近90%；GAS-MVLs在前6 h釋放速度較快，隨后接近平衡，72 h最大累積釋放率在65%左右。穩(wěn)定性試驗(yàn)中GAS-MVLs的平均粒徑緩慢增大，包封率緩慢下降。藥動(dòng)學(xué)試驗(yàn)Re為5.70、Te為0.37、Ce為2.04。結(jié)論 采用微流控技術(shù)成功制備GAS-MVLs，可顯著提高GAS的腦內(nèi)富集程度。
2024, 47(9):2067-2074.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.014
摘要:
目的 以3種不同的抗體包被方法，評(píng)估人外周血細(xì)胞在OKT3刺激前后細(xì)胞分泌各種細(xì)胞因子的含量，為免疫治療藥物上市前的臨床前及臨床研究提供理論依據(jù)。方法 健康人外周血經(jīng)密度梯度離心法制備得到外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）后液氮罐中凍存?zhèn)溆?，在固相干法、固相濕法（包?4、48 h）及液相法條件下，不同OKT3刺激濃度（1、2 μg·孔-1）、刺激時(shí)間（24、48 h）下，以多功能流式點(diǎn)陣儀（Luminex）檢測(cè)分泌細(xì)胞因子的表達(dá)水平。結(jié)果 固相干法中OKT3刺激PBMC細(xì)胞釋放細(xì)胞因子顯著，OKT3包被48 h、刺激48 h各細(xì)胞因子（IL-2、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α）分別為陰性對(duì)照的6、2、22、214、51倍（1 μg·孔-1），5、2、26、194、48倍（2 μg·孔-1）；OKT3包被48 h、刺激24 h各細(xì)胞因子（IL-2、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α）分別為陰性對(duì)照的3、2、2、171、19倍（1 μg·孔-1），4、2、3、174、21倍（2 μg·孔-1）；OKT3包被24 h、刺激48 h試驗(yàn)組中，各細(xì)胞因子（IL-2、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α）分別為陰性對(duì)照的6、2、28、356、50倍（1 μg·孔-1），6、2、35、349、64倍（2 μg·孔-1）； OKT3包被24 h、刺激24 h各細(xì)胞因子（IL-2、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α）分別為陰性對(duì)照的3、2、1、127、16倍（1 μg·孔-1），3、1、2、115、13倍（2 μg·孔-1），表明隨著OKT3包被時(shí)間延長(zhǎng)、與PBMC作用時(shí)間延長(zhǎng)組別效果更明顯；固相濕法與液相法中IL-10呈現(xiàn)明顯的含量降低，且二者在釋放程度上相當(dāng)，無組別關(guān)系。結(jié)論 固相干法孵育系統(tǒng)較固相濕法及液相法有明顯的優(yōu)勢(shì)，并且OKT3作為陽性對(duì)照刺激PBMC誘導(dǎo)人體外細(xì)胞因子釋放效果顯著，可以在藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)遵循GLP的毒理學(xué)試驗(yàn)中使用該方法評(píng)估藥物引起細(xì)胞因子風(fēng)暴的風(fēng)險(xiǎn)。
目的 以3種不同的抗體包被方法，評(píng)估人外周血細(xì)胞在OKT3刺激前后細(xì)胞分泌各種細(xì)胞因子的含量，為免疫治療藥物上市前的臨床前及臨床研究提供理論依據(jù)。方法 健康人外周血經(jīng)密度梯度離心法制備得到外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）后液氮罐中凍存?zhèn)溆?，在固相干法、固相濕法（包?4、48 h）及液相法條件下，不同OKT3刺激濃度（1、2 μg·孔-1）、刺激時(shí)間（24、48 h）下，以多功能流式點(diǎn)陣儀（Luminex）檢測(cè)分泌細(xì)胞因子的表達(dá)水平。結(jié)果 固相干法中OKT3刺激PBMC細(xì)胞釋放細(xì)胞因子顯著，OKT3包被48 h、刺激48 h各細(xì)胞因子（IL-2、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α）分別為陰性對(duì)照的6、2、22、214、51倍（1 μg·孔-1），5、2、26、194、48倍（2 μg·孔-1）；OKT3包被48 h、刺激24 h各細(xì)胞因子（IL-2、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α）分別為陰性對(duì)照的3、2、2、171、19倍（1 μg·孔-1），4、2、3、174、21倍（2 μg·孔-1）；OKT3包被24 h、刺激48 h試驗(yàn)組中，各細(xì)胞因子（IL-2、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α）分別為陰性對(duì)照的6、2、28、356、50倍（1 μg·孔-1），6、2、35、349、64倍（2 μg·孔-1）； OKT3包被24 h、刺激24 h各細(xì)胞因子（IL-2、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α）分別為陰性對(duì)照的3、2、1、127、16倍（1 μg·孔-1），3、1、2、115、13倍（2 μg·孔-1），表明隨著OKT3包被時(shí)間延長(zhǎng)、與PBMC作用時(shí)間延長(zhǎng)組別效果更明顯；固相濕法與液相法中IL-10呈現(xiàn)明顯的含量降低，且二者在釋放程度上相當(dāng)，無組別關(guān)系。結(jié)論 固相干法孵育系統(tǒng)較固相濕法及液相法有明顯的優(yōu)勢(shì)，并且OKT3作為陽性對(duì)照刺激PBMC誘導(dǎo)人體外細(xì)胞因子釋放效果顯著，可以在藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)遵循GLP的毒理學(xué)試驗(yàn)中使用該方法評(píng)估藥物引起細(xì)胞因子風(fēng)暴的風(fēng)險(xiǎn)。
2024, 47(9):2075-2081.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.015
摘要:
目的 通過比較不同的校正公式來確定適合清醒Beagle犬QT間期校正的公式，以用于非臨床安全藥理學(xué)研究。方法 用12只已進(jìn)行遙測(cè)植入的Beagle犬（雌、雄各半）連續(xù)采集至少24 h的心電圖數(shù)據(jù)，測(cè)量并分析該期間內(nèi)動(dòng)物的RR和QT間期，采用8種校正公式（QTcF、QTcB、QTcHDG、QTcV、QTcFRM、QTcNAK、QTcI、QTca）計(jì)算QTc，然后對(duì)不同校正公式計(jì)算的QTc與RR進(jìn)行線性回歸分析，尋找R值最接近零和P值最大的校正公式，并進(jìn)行性別間的差異比較。結(jié)果 使用8種校正公式計(jì)算的QTc比較顯示，QTca個(gè)體校正公式校正的R值為-0.025，P值為0.679；QTcI校正的R值為-0.040，P值為0.501；QTcF校正的R值為0.044，P值為0.461。與其他公式相比QTca校正公式的R值最接近于零并且P值最高，表明QTca計(jì)算的QTc受RR的影響程度最小，且表明QTc與RR 2個(gè)變量之間無顯著相關(guān)性。在雄性Beagle犬中，通過QTcI個(gè)體校正公式校正的R值為0.070，P值為0.401；其次是QTca，R值為0.072，P值為0.391；再者為QTcF，R值為0.118，P值為0.159。在雌性Beagle犬中，通過QTcF通用校正公式校正的R值為-0.026，P值為0.755；其次是QTca，R值為-0.135，P值為0.108。雄性和雌性Beagle犬之間通過與其他公式的R值和P值的比較，表明QTca和QTcF校正公式計(jì)算的QTc都受RR影響程度較小且表明QTc與RR 2個(gè)變量之間無顯著相關(guān)性。結(jié)論 在本機(jī)構(gòu)試驗(yàn)條件下，使用個(gè)體校正公式QTca更適合校正清醒無束縛條件下Beagle犬的QT間期，可作為安全藥理學(xué)研究中的優(yōu)選方式。
目的 通過比較不同的校正公式來確定適合清醒Beagle犬QT間期校正的公式，以用于非臨床安全藥理學(xué)研究。方法 用12只已進(jìn)行遙測(cè)植入的Beagle犬（雌、雄各半）連續(xù)采集至少24 h的心電圖數(shù)據(jù)，測(cè)量并分析該期間內(nèi)動(dòng)物的RR和QT間期，采用8種校正公式（QTcF、QTcB、QTcHDG、QTcV、QTcFRM、QTcNAK、QTcI、QTca）計(jì)算QTc，然后對(duì)不同校正公式計(jì)算的QTc與RR進(jìn)行線性回歸分析，尋找R值最接近零和P值最大的校正公式，并進(jìn)行性別間的差異比較。結(jié)果 使用8種校正公式計(jì)算的QTc比較顯示，QTca個(gè)體校正公式校正的R值為-0.025，P值為0.679；QTcI校正的R值為-0.040，P值為0.501；QTcF校正的R值為0.044，P值為0.461。與其他公式相比QTca校正公式的R值最接近于零并且P值最高，表明QTca計(jì)算的QTc受RR的影響程度最小，且表明QTc與RR 2個(gè)變量之間無顯著相關(guān)性。在雄性Beagle犬中，通過QTcI個(gè)體校正公式校正的R值為0.070，P值為0.401；其次是QTca，R值為0.072，P值為0.391；再者為QTcF，R值為0.118，P值為0.159。在雌性Beagle犬中，通過QTcF通用校正公式校正的R值為-0.026，P值為0.755；其次是QTca，R值為-0.135，P值為0.108。雄性和雌性Beagle犬之間通過與其他公式的R值和P值的比較，表明QTca和QTcF校正公式計(jì)算的QTc都受RR影響程度較小且表明QTc與RR 2個(gè)變量之間無顯著相關(guān)性。結(jié)論 在本機(jī)構(gòu)試驗(yàn)條件下，使用個(gè)體校正公式QTca更適合校正清醒無束縛條件下Beagle犬的QT間期，可作為安全藥理學(xué)研究中的優(yōu)選方式。
2024, 47(9):2082-2089.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.016
摘要:
目的 建立大鼠血漿及肺部組織中溴己新濃度測(cè)定的LC-MS/MS方法，并對(duì)大鼠給予鹽酸溴己新霧化吸入溶液受試制劑與參比制劑后藥物在血漿及肺部組織分布進(jìn)行比較。方法 樣品處理采用簡(jiǎn)便的蛋白沉淀法，內(nèi)標(biāo)為苯海拉明，采用ZORBAX Eclipse XDB-C18色譜柱，有機(jī)相為甲醇，水相為0.5%甲酸-5%甲醇水溶液，采用梯度程序進(jìn)行洗脫，在電噴霧離子化源（ESI）的正離子模式下以多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）方式進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)血漿和肺組織中溴己新的分析方法分別進(jìn)行了完整驗(yàn)證和部分驗(yàn)證。健康SD大鼠隨機(jī)分為兩組，分別霧化吸入給予鹽酸溴己新霧化吸入溶液受試及參比制劑，定時(shí)采集血漿、肺、氣管支氣管并測(cè)定溴己新的濃度。結(jié)果 血漿及肺組織中溴己新濃度測(cè)定的分析方法驗(yàn)證各項(xiàng)均符合指導(dǎo)原則規(guī)定。受試制劑與參比制劑在大鼠血漿、肺、氣管支氣管中的分布速度、分布程度基本一致，在主要靶部位氣管支氣管中的相對(duì)生物利用度為97.4%。結(jié)論 建立的LC-MS/MS分析方法快速、靈敏、簡(jiǎn)便，兩種制劑在大鼠血漿及肺部組織分布具有一致性，可為該新劑型的國(guó)產(chǎn)化提供數(shù)據(jù)支持。
目的 建立大鼠血漿及肺部組織中溴己新濃度測(cè)定的LC-MS/MS方法，并對(duì)大鼠給予鹽酸溴己新霧化吸入溶液受試制劑與參比制劑后藥物在血漿及肺部組織分布進(jìn)行比較。方法 樣品處理采用簡(jiǎn)便的蛋白沉淀法，內(nèi)標(biāo)為苯海拉明，采用ZORBAX Eclipse XDB-C18色譜柱，有機(jī)相為甲醇，水相為0.5%甲酸-5%甲醇水溶液，采用梯度程序進(jìn)行洗脫，在電噴霧離子化源（ESI）的正離子模式下以多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）方式進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)血漿和肺組織中溴己新的分析方法分別進(jìn)行了完整驗(yàn)證和部分驗(yàn)證。健康SD大鼠隨機(jī)分為兩組，分別霧化吸入給予鹽酸溴己新霧化吸入溶液受試及參比制劑，定時(shí)采集血漿、肺、氣管支氣管并測(cè)定溴己新的濃度。結(jié)果 血漿及肺組織中溴己新濃度測(cè)定的分析方法驗(yàn)證各項(xiàng)均符合指導(dǎo)原則規(guī)定。受試制劑與參比制劑在大鼠血漿、肺、氣管支氣管中的分布速度、分布程度基本一致，在主要靶部位氣管支氣管中的相對(duì)生物利用度為97.4%。結(jié)論 建立的LC-MS/MS分析方法快速、靈敏、簡(jiǎn)便，兩種制劑在大鼠血漿及肺部組織分布具有一致性，可為該新劑型的國(guó)產(chǎn)化提供數(shù)據(jù)支持。
2024, 47(9):2090-2098.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.017
摘要:
目的 探討蔓性千斤拔素A通過細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK）/哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞自噬的影響。方法 將A549細(xì)胞分為對(duì)照組及蔓性千斤拔素A低、中、高濃度（20、25、30 μmol·L-1）組或?qū)φ战M、蔓性千斤拔素A 30 μmol·L-1、SCH772984 10 μmol·L-1+蔓性千斤拔素A 30 μmol·L-1和SCH772984 10 μmol·L-1濃度組，對(duì)照組細(xì)胞培養(yǎng)液為含1%胎牛血清的RMPI 1640培養(yǎng)基，其余各組分別加入蔓性千斤拔素A或SCH772984（預(yù)處理細(xì)胞1 h）使達(dá)到相應(yīng)濃度，連續(xù)培養(yǎng)12 h。MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力；細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞集落形成的情況；細(xì)胞自噬染色檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)自噬的情況；免疫熒光檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)LC3B蛋白表達(dá)水平的變化；Western blotting實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)磷酸化的細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（p-ERK）、磷酸化的哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶標(biāo)（p-mTOR）、自噬相關(guān)蛋白Beclin 1（Beclin 1）、螯合體1（P62）蛋白表達(dá)水平的變化。結(jié)果 與對(duì)照組比較，MTT法檢測(cè)結(jié)果顯示各濃度（20、25、30 μmol·L-1）蔓性千斤拔素A能夠顯著抑制A549細(xì)胞活力（P＜0.05、0.001），SCH772948 （10 μmol·L-1）能夠顯著逆轉(zhuǎn)蔓性千斤拔素A誘導(dǎo)的A549細(xì)胞死亡（P＜0.01）；細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)顯示20、25、30 μmol·L-1蔓性千斤拔素A能顯著抑制A549細(xì)胞集落的形成（P＜0.001）；細(xì)胞自噬染色檢測(cè)試劑盒結(jié)果顯示20、25、30 μmol·L-1蔓性千斤拔素A能顯著抑制A549細(xì)胞自噬，SCH772948 10 μmol·L-1能夠顯著逆轉(zhuǎn)蔓性千斤拔素A介導(dǎo)的A549細(xì)胞自噬抑制；免疫熒光結(jié)果顯示蔓性千斤拔素A 30 μmol·L-1能夠顯著減弱LC3B的熒光，SCH772948 10 μmol·L-1能夠顯著逆轉(zhuǎn)蔓性千斤拔素A導(dǎo)致的LC3B熒光減弱；Western blotting實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，20、25、30 μmol·L-1蔓性千斤拔素A能夠使A549細(xì)胞內(nèi)p-ERK、p-mTOR、P62蛋白表達(dá)水平顯著升高及Beclin 1蛋白表達(dá)水平顯著降低（P＜0.001），SCH772948 10 μmol·L-1能夠顯著逆轉(zhuǎn)蔓性千斤拔素A導(dǎo)致的A549細(xì)胞內(nèi)p-ERK、p-mTOR、P62蛋白表達(dá)水平升高及Beclin 1蛋白降低（P＜0.001）。結(jié)論 蔓性千斤拔素A可通過ERK/mTOR通路抑制非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞自噬并導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
目的 探討蔓性千斤拔素A通過細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK）/哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞自噬的影響。方法 將A549細(xì)胞分為對(duì)照組及蔓性千斤拔素A低、中、高濃度（20、25、30 μmol·L-1）組或?qū)φ战M、蔓性千斤拔素A 30 μmol·L-1、SCH772984 10 μmol·L-1+蔓性千斤拔素A 30 μmol·L-1和SCH772984 10 μmol·L-1濃度組，對(duì)照組細(xì)胞培養(yǎng)液為含1%胎牛血清的RMPI 1640培養(yǎng)基，其余各組分別加入蔓性千斤拔素A或SCH772984（預(yù)處理細(xì)胞1 h）使達(dá)到相應(yīng)濃度，連續(xù)培養(yǎng)12 h。MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力；細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞集落形成的情況；細(xì)胞自噬染色檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)自噬的情況；免疫熒光檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)LC3B蛋白表達(dá)水平的變化；Western blotting實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)磷酸化的細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（p-ERK）、磷酸化的哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶標(biāo)（p-mTOR）、自噬相關(guān)蛋白Beclin 1（Beclin 1）、螯合體1（P62）蛋白表達(dá)水平的變化。結(jié)果 與對(duì)照組比較，MTT法檢測(cè)結(jié)果顯示各濃度（20、25、30 μmol·L-1）蔓性千斤拔素A能夠顯著抑制A549細(xì)胞活力（P＜0.05、0.001），SCH772948 （10 μmol·L-1）能夠顯著逆轉(zhuǎn)蔓性千斤拔素A誘導(dǎo)的A549細(xì)胞死亡（P＜0.01）；細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)顯示20、25、30 μmol·L-1蔓性千斤拔素A能顯著抑制A549細(xì)胞集落的形成（P＜0.001）；細(xì)胞自噬染色檢測(cè)試劑盒結(jié)果顯示20、25、30 μmol·L-1蔓性千斤拔素A能顯著抑制A549細(xì)胞自噬，SCH772948 10 μmol·L-1能夠顯著逆轉(zhuǎn)蔓性千斤拔素A介導(dǎo)的A549細(xì)胞自噬抑制；免疫熒光結(jié)果顯示蔓性千斤拔素A 30 μmol·L-1能夠顯著減弱LC3B的熒光，SCH772948 10 μmol·L-1能夠顯著逆轉(zhuǎn)蔓性千斤拔素A導(dǎo)致的LC3B熒光減弱；Western blotting實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，20、25、30 μmol·L-1蔓性千斤拔素A能夠使A549細(xì)胞內(nèi)p-ERK、p-mTOR、P62蛋白表達(dá)水平顯著升高及Beclin 1蛋白表達(dá)水平顯著降低（P＜0.001），SCH772948 10 μmol·L-1能夠顯著逆轉(zhuǎn)蔓性千斤拔素A導(dǎo)致的A549細(xì)胞內(nèi)p-ERK、p-mTOR、P62蛋白表達(dá)水平升高及Beclin 1蛋白降低（P＜0.001）。結(jié)論 蔓性千斤拔素A可通過ERK/mTOR通路抑制非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞自噬并導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
2024, 47(9):2099-2106.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.018
摘要:
目的 評(píng)價(jià)益胃湯加味對(duì)乙醇誘導(dǎo)胃潰瘍模型大鼠的保護(hù)作用。方法 SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組及益胃湯加味低、中、高劑量（0.8、1.2、1.7 g·kg-1）組，每組8只，各組均按劑量預(yù)給藥30 d后，全部動(dòng)物嚴(yán)格禁食24 h（不禁水）。除對(duì)照組外，其余大鼠每只均ig給予無水乙醇1.0 mL，1 h后犧牲動(dòng)物取材。暴露完整胃，展開胃黏膜面拍照，對(duì)損傷進(jìn)行評(píng)分；取部分胃組織進(jìn)行蘇木精-伊紅（HE）染色；另取部分胃組織測(cè)定髓過氧化物酶（MPO）、總超氧化物歧化酶（SOD）、前列腺素E2（PGE2）、胃蛋白酶原Ⅰ（PGⅠ）、胃蛋白酶原Ⅱ（PGⅡ）水平；取血清檢測(cè)其中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平。此外，體外培養(yǎng)人胃黏膜上皮細(xì)胞（GES-1）及人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC），通過MTT與劃痕實(shí)驗(yàn)，評(píng)價(jià)益胃湯加味對(duì)增殖及遷移的作用。結(jié)果 益胃湯加味可顯著減輕胃黏膜損傷和降低胃黏膜病理評(píng)分（P＜0.001）；顯著降低胃MPO活力并提高SOD活力（P＜0.05、0.001）；顯著提高胃PGE2、PG Ⅰ、PG Ⅱ水平（P＜0.05、0.001）；顯著降低血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平（P＜0.01、0.001）；增加血清VEGF水平（P＜0.05），促進(jìn)GES-1和HUVEC細(xì)胞增殖與遷移（P＜0.01、0.001）。結(jié)論 益胃湯加味可通過抑制炎癥因子分泌，緩解機(jī)體氧化應(yīng)激，保護(hù)胃黏膜以及促進(jìn)細(xì)胞增殖遷移等多種途徑發(fā)揮對(duì)胃潰瘍模型大鼠的保護(hù)作用。
目的 評(píng)價(jià)益胃湯加味對(duì)乙醇誘導(dǎo)胃潰瘍模型大鼠的保護(hù)作用。方法 SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組及益胃湯加味低、中、高劑量（0.8、1.2、1.7 g·kg-1）組，每組8只，各組均按劑量預(yù)給藥30 d后，全部動(dòng)物嚴(yán)格禁食24 h（不禁水）。除對(duì)照組外，其余大鼠每只均ig給予無水乙醇1.0 mL，1 h后犧牲動(dòng)物取材。暴露完整胃，展開胃黏膜面拍照，對(duì)損傷進(jìn)行評(píng)分；取部分胃組織進(jìn)行蘇木精-伊紅（HE）染色；另取部分胃組織測(cè)定髓過氧化物酶（MPO）、總超氧化物歧化酶（SOD）、前列腺素E2（PGE2）、胃蛋白酶原Ⅰ（PGⅠ）、胃蛋白酶原Ⅱ（PGⅡ）水平；取血清檢測(cè)其中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平。此外，體外培養(yǎng)人胃黏膜上皮細(xì)胞（GES-1）及人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC），通過MTT與劃痕實(shí)驗(yàn)，評(píng)價(jià)益胃湯加味對(duì)增殖及遷移的作用。結(jié)果 益胃湯加味可顯著減輕胃黏膜損傷和降低胃黏膜病理評(píng)分（P＜0.001）；顯著降低胃MPO活力并提高SOD活力（P＜0.05、0.001）；顯著提高胃PGE2、PG Ⅰ、PG Ⅱ水平（P＜0.05、0.001）；顯著降低血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平（P＜0.01、0.001）；增加血清VEGF水平（P＜0.05），促進(jìn)GES-1和HUVEC細(xì)胞增殖與遷移（P＜0.01、0.001）。結(jié)論 益胃湯加味可通過抑制炎癥因子分泌，緩解機(jī)體氧化應(yīng)激，保護(hù)胃黏膜以及促進(jìn)細(xì)胞增殖遷移等多種途徑發(fā)揮對(duì)胃潰瘍模型大鼠的保護(hù)作用。
2024, 47(9):2107-2115.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.019
摘要:
目的 挖掘阿那白滯素（Anakinra）不良事件信號(hào)，為臨床安全合理用藥提供參考。方法 提取FAERS數(shù)據(jù)庫(kù)建庫(kù)至2023年第4季度的不良事件數(shù)據(jù)，利用報(bào)告比值比法（ROR）和貝葉斯可信區(qū)間遞進(jìn)神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)法（BCPNN）對(duì)Anakinra可疑風(fēng)險(xiǎn)信號(hào)進(jìn)行挖掘。結(jié)果 共獲得相關(guān)不良事件報(bào)告7 428份，性別以女性（64.9%）為主，上報(bào)國(guó)家以美國(guó)（63.57%）為主。共檢測(cè)到174個(gè)風(fēng)險(xiǎn)信號(hào)，涉及21個(gè)系統(tǒng)和器官分類，主要為全身性疾病及給藥部位各種反應(yīng)（4 362例，40.11%），各類損傷、中毒及操作并發(fā)癥（3 722例，34.22%），發(fā)生頻次較高的首選術(shù)語（PT）包括超說明書使用、注射部位各種反應(yīng)等，新發(fā)現(xiàn)可疑不良反應(yīng)包括肝膽系統(tǒng)相關(guān)不良反應(yīng)、水痘等。剔除消費(fèi)者和未知職業(yè)人員報(bào)告后分析結(jié)論同上。結(jié)論 Anakinra相關(guān)PT信號(hào)涉及系統(tǒng)器官較為廣泛，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)Anakinra的臨床規(guī)范化使用管理及超說明書用藥管理，醫(yī)務(wù)人員應(yīng)幫助患者克服注射部位反應(yīng)、加強(qiáng)用藥依從性，在臨床應(yīng)用時(shí)應(yīng)考慮藥物對(duì)實(shí)驗(yàn)室相關(guān)指標(biāo)的影響，在對(duì)待感染性疾病及免疫功能低下患者時(shí)應(yīng)謹(jǐn)慎使用Anakinra，同時(shí)應(yīng)警惕肝膽系統(tǒng)相關(guān)不良反應(yīng)。
目的 挖掘阿那白滯素（Anakinra）不良事件信號(hào)，為臨床安全合理用藥提供參考。方法 提取FAERS數(shù)據(jù)庫(kù)建庫(kù)至2023年第4季度的不良事件數(shù)據(jù)，利用報(bào)告比值比法（ROR）和貝葉斯可信區(qū)間遞進(jìn)神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)法（BCPNN）對(duì)Anakinra可疑風(fēng)險(xiǎn)信號(hào)進(jìn)行挖掘。結(jié)果 共獲得相關(guān)不良事件報(bào)告7 428份，性別以女性（64.9%）為主，上報(bào)國(guó)家以美國(guó)（63.57%）為主。共檢測(cè)到174個(gè)風(fēng)險(xiǎn)信號(hào)，涉及21個(gè)系統(tǒng)和器官分類，主要為全身性疾病及給藥部位各種反應(yīng)（4 362例，40.11%），各類損傷、中毒及操作并發(fā)癥（3 722例，34.22%），發(fā)生頻次較高的首選術(shù)語（PT）包括超說明書使用、注射部位各種反應(yīng)等，新發(fā)現(xiàn)可疑不良反應(yīng)包括肝膽系統(tǒng)相關(guān)不良反應(yīng)、水痘等。剔除消費(fèi)者和未知職業(yè)人員報(bào)告后分析結(jié)論同上。結(jié)論 Anakinra相關(guān)PT信號(hào)涉及系統(tǒng)器官較為廣泛，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)Anakinra的臨床規(guī)范化使用管理及超說明書用藥管理，醫(yī)務(wù)人員應(yīng)幫助患者克服注射部位反應(yīng)、加強(qiáng)用藥依從性，在臨床應(yīng)用時(shí)應(yīng)考慮藥物對(duì)實(shí)驗(yàn)室相關(guān)指標(biāo)的影響，在對(duì)待感染性疾病及免疫功能低下患者時(shí)應(yīng)謹(jǐn)慎使用Anakinra，同時(shí)應(yīng)警惕肝膽系統(tǒng)相關(guān)不良反應(yīng)。
2024, 47(9):2116-2121.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.020
摘要:
目的 觀察和分析環(huán)泊酚在燒傷切痂植皮手術(shù)全身麻醉誘導(dǎo)的有效性及安全性。方法 選取2021年3月—2023年6月南開大學(xué)附屬醫(yī)院（天津市第四醫(yī)院）燒傷外科收治的符合納入標(biāo)準(zhǔn)的燒傷切痂植皮手術(shù)成年患者216例，男139例，女77例，年齡18～59歲，身體質(zhì)量指數(shù)（BMI）19.6～29.2 kg·m-2，隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組（111例）和對(duì)照組（105例），麻醉誘導(dǎo)：觀察組采用環(huán)泊酚0.4 mg·kg-1，對(duì)照組采用丙泊酚2.0 mg·kg-1，其余麻醉誘導(dǎo)藥物保持一致。觀察和比較兩組患者入手術(shù)室（T0）、環(huán)泊酚/丙泊酚注射完畢時(shí)（T1）、插管完成即刻（T2）、插管后10 min（T3）、切痂時(shí)（T4）各時(shí)間點(diǎn)的平均動(dòng)脈壓（MAP）、心率（HR）和腦電雙頻指數(shù)（BIS），T0和T1的呼吸頻率（RR），鎮(zhèn)靜成功時(shí)間、睫毛反射消失時(shí)間，以及注射痛、低血壓、心動(dòng)過緩等不良反應(yīng)的發(fā)生情況。結(jié)果 兩組間患者基線數(shù)據(jù)的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；相較于對(duì)照組，觀察組T1、T2時(shí)MAP、HR更高、BIS更低（P＜0.05）；觀察組T1的RR更高（P＜0.05）；觀察組鎮(zhèn)靜成功時(shí)間、睫毛反射消失時(shí)間更短（P＜0.05）；觀察組注射痛發(fā)生率更低（P＜0.05）。結(jié)論 環(huán)泊酚具有良好的鎮(zhèn)靜效果，相較于丙泊酚，環(huán)泊酚在燒傷切痂植皮手術(shù)全身麻醉誘導(dǎo)后血流動(dòng)力學(xué)更加平穩(wěn)，注射痛等不良反應(yīng)更少，值得臨床推廣應(yīng)用。
目的 觀察和分析環(huán)泊酚在燒傷切痂植皮手術(shù)全身麻醉誘導(dǎo)的有效性及安全性。方法 選取2021年3月—2023年6月南開大學(xué)附屬醫(yī)院（天津市第四醫(yī)院）燒傷外科收治的符合納入標(biāo)準(zhǔn)的燒傷切痂植皮手術(shù)成年患者216例，男139例，女77例，年齡18～59歲，身體質(zhì)量指數(shù)（BMI）19.6～29.2 kg·m-2，隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組（111例）和對(duì)照組（105例），麻醉誘導(dǎo)：觀察組采用環(huán)泊酚0.4 mg·kg-1，對(duì)照組采用丙泊酚2.0 mg·kg-1，其余麻醉誘導(dǎo)藥物保持一致。觀察和比較兩組患者入手術(shù)室（T0）、環(huán)泊酚/丙泊酚注射完畢時(shí)（T1）、插管完成即刻（T2）、插管后10 min（T3）、切痂時(shí)（T4）各時(shí)間點(diǎn)的平均動(dòng)脈壓（MAP）、心率（HR）和腦電雙頻指數(shù)（BIS），T0和T1的呼吸頻率（RR），鎮(zhèn)靜成功時(shí)間、睫毛反射消失時(shí)間，以及注射痛、低血壓、心動(dòng)過緩等不良反應(yīng)的發(fā)生情況。結(jié)果 兩組間患者基線數(shù)據(jù)的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；相較于對(duì)照組，觀察組T1、T2時(shí)MAP、HR更高、BIS更低（P＜0.05）；觀察組T1的RR更高（P＜0.05）；觀察組鎮(zhèn)靜成功時(shí)間、睫毛反射消失時(shí)間更短（P＜0.05）；觀察組注射痛發(fā)生率更低（P＜0.05）。結(jié)論 環(huán)泊酚具有良好的鎮(zhèn)靜效果，相較于丙泊酚，環(huán)泊酚在燒傷切痂植皮手術(shù)全身麻醉誘導(dǎo)后血流動(dòng)力學(xué)更加平穩(wěn)，注射痛等不良反應(yīng)更少，值得臨床推廣應(yīng)用。
2024, 47(9):2122-2129.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.021
摘要:
目的 分析和評(píng)價(jià)乙酰半胱氨酸（NAC）肺泡灌洗聯(lián)合支氣管鏡肺泡灌洗術(shù)對(duì)兒童肺實(shí)變及肺不張的治療效果和安全性。方法 選取146例肺實(shí)變及肺不張患兒作為研究對(duì)象，分為研究組（48例，采用NAC肺泡灌洗聯(lián)合支氣管鏡肺泡灌洗術(shù)治療）和對(duì)照組（98例，采用支氣管鏡肺泡灌洗術(shù)治療）。對(duì)兩組患兒的臨床療效、治療指標(biāo)、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)、動(dòng)脈血?dú)庵笜?biāo)、肺功能指標(biāo)和氧合指數(shù)（OI）、血清表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白-A（SP-A）、氧化應(yīng)激指標(biāo)及安全性進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果 研究組患兒的療效優(yōu)于對(duì)照組（P＜0.05）。研究組患兒的肺部啰音消失時(shí)間、體溫恢復(fù)時(shí)間、住院時(shí)間均短于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）。兩組患兒治療前實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)、動(dòng)脈血?dú)庵笜?biāo)、肺功能指標(biāo)、OI的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在灌洗治療后，兩組患兒的外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、血清C反應(yīng)蛋白（CRP）、降鈣素原（PCT）水平、動(dòng)脈二氧化碳分壓（PaCO2）水平均較治療前降低，動(dòng)脈血氧分壓（PaO2）、動(dòng)脈血氧飽和度（SaO2）、第1秒用力呼氣容積（FEV1）、用力肺活量（FVC）、FEV1占FVC的百分比（FEV1/FVC）、OI水平均較治療前升高，同組治療前后的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）；研究組患兒治療后的WBC、CRP、PCT、PaCO2水平均低于對(duì)照組，PaO2、SaO2、FEV1、FCV、FEV1/PVC、OI水平均高于對(duì)照組，兩組間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）。兩組患兒治療前血清SP-A水平和氧化應(yīng)激指標(biāo)的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在灌洗治療后，兩組患兒血清SP-A、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）水平均較治療前升高，血清丙二醛（MDA）水平均較治療前下降，同組治療前、后的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）；研究組患兒治療后的血清SP-A、SOD、GSH-Px水平均高于對(duì)照組，血清MDA水平低于對(duì)照組，兩組之間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）。兩組不良反應(yīng)的發(fā)生率無統(tǒng)計(jì)意義。結(jié)論 針對(duì)兒童肺實(shí)變和肺不張，在支氣管鏡肺泡灌洗術(shù)治療中聯(lián)合采用NAC肺泡灌洗治療，可提升臨床療效，顯著緩解患兒炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激水平，改善肺功能和動(dòng)脈血?dú)庵笜?biāo)，提升組織氧合水平，促進(jìn)肺組織順應(yīng)性恢復(fù)，不會(huì)增加治療不良反應(yīng)。
目的 分析和評(píng)價(jià)乙酰半胱氨酸（NAC）肺泡灌洗聯(lián)合支氣管鏡肺泡灌洗術(shù)對(duì)兒童肺實(shí)變及肺不張的治療效果和安全性。方法 選取146例肺實(shí)變及肺不張患兒作為研究對(duì)象，分為研究組（48例，采用NAC肺泡灌洗聯(lián)合支氣管鏡肺泡灌洗術(shù)治療）和對(duì)照組（98例，采用支氣管鏡肺泡灌洗術(shù)治療）。對(duì)兩組患兒的臨床療效、治療指標(biāo)、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)、動(dòng)脈血?dú)庵笜?biāo)、肺功能指標(biāo)和氧合指數(shù)（OI）、血清表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白-A（SP-A）、氧化應(yīng)激指標(biāo)及安全性進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果 研究組患兒的療效優(yōu)于對(duì)照組（P＜0.05）。研究組患兒的肺部啰音消失時(shí)間、體溫恢復(fù)時(shí)間、住院時(shí)間均短于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）。兩組患兒治療前實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)、動(dòng)脈血?dú)庵笜?biāo)、肺功能指標(biāo)、OI的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在灌洗治療后，兩組患兒的外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、血清C反應(yīng)蛋白（CRP）、降鈣素原（PCT）水平、動(dòng)脈二氧化碳分壓（PaCO2）水平均較治療前降低，動(dòng)脈血氧分壓（PaO2）、動(dòng)脈血氧飽和度（SaO2）、第1秒用力呼氣容積（FEV1）、用力肺活量（FVC）、FEV1占FVC的百分比（FEV1/FVC）、OI水平均較治療前升高，同組治療前后的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）；研究組患兒治療后的WBC、CRP、PCT、PaCO2水平均低于對(duì)照組，PaO2、SaO2、FEV1、FCV、FEV1/PVC、OI水平均高于對(duì)照組，兩組間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）。兩組患兒治療前血清SP-A水平和氧化應(yīng)激指標(biāo)的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在灌洗治療后，兩組患兒血清SP-A、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）水平均較治療前升高，血清丙二醛（MDA）水平均較治療前下降，同組治療前、后的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）；研究組患兒治療后的血清SP-A、SOD、GSH-Px水平均高于對(duì)照組，血清MDA水平低于對(duì)照組，兩組之間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）。兩組不良反應(yīng)的發(fā)生率無統(tǒng)計(jì)意義。結(jié)論 針對(duì)兒童肺實(shí)變和肺不張，在支氣管鏡肺泡灌洗術(shù)治療中聯(lián)合采用NAC肺泡灌洗治療，可提升臨床療效，顯著緩解患兒炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激水平，改善肺功能和動(dòng)脈血?dú)庵笜?biāo)，提升組織氧合水平，促進(jìn)肺組織順應(yīng)性恢復(fù)，不會(huì)增加治療不良反應(yīng)。
2024, 47(9):2130-2146.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.022
摘要:
目的 通過Meta分析的方法評(píng)價(jià)穩(wěn)心顆粒對(duì)房顫患者心臟結(jié)構(gòu)重構(gòu)及炎癥因子的影響。方法 檢索PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of Science、中國(guó)學(xué)術(shù)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)（CNKI）、萬方數(shù)據(jù)庫(kù)（Wanfang Data）、中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(kù)（CBM）、維普生物醫(yī)學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)（VIP）中穩(wěn)心顆粒治療房顫的臨床隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)（RCTs）；使用Excel錄入文獻(xiàn)基本信息；使用RevMan 5.4進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)、異質(zhì)性檢驗(yàn)及森林圖繪制；使用StataMP 17.0進(jìn)行漏斗圖繪制及Egger檢驗(yàn)。結(jié)果 共納入39項(xiàng)RCTs，包含4 211例研究對(duì)象。Meta分析結(jié)果顯示：穩(wěn)心顆粒可提高房顫患者左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF，MD＝6.01，95%置信區(qū)間（CI）［5.03，6.99］，P＜0.000 01），降低房顫患者左室舒張末期內(nèi)徑（LVEDd，MD＝-6.35，95% CI ［-7.66，-5.04］，P＜0.000 01）、左室收縮末期內(nèi)徑（LVESd，MD＝-4.35，95% CI［-4.80，-3.90］，P＜0.000 01）、左房?jī)?nèi)徑（LAd，MD＝-3.63，95% CI ［-5.43，-1.83］，P＜0.000 1）、超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP，MD＝-2.28，95% CI ［-3.07，-1.48］，P＜0.000 01）、C反應(yīng)蛋白（CRP，MD＝-5.71，95% CI ［-6.62，-4.79］，P＜0.000 01）、白細(xì)胞介素-6（IL-6，MD＝-10.37，95% CI ［-17.00，-3.74 ］，P ＝ 0.002 ）、基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9，MD＝-23.27，95% CI ［-26.42，-20.11］，P＜0.000 01）、基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2，MD＝-55.85，95% CI［-90.44，-21.27］，P＝0.002），其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。試驗(yàn)組不良反應(yīng)發(fā)生率低于對(duì)照組（RR＝0.74，95% CI ［0.59，0.93］，P＝0.009），其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 穩(wěn)心顆?？筛纳品款澔颊呓Y(jié)構(gòu)重構(gòu)指標(biāo)、降低炎癥因子，且安全性較好。
目的 通過Meta分析的方法評(píng)價(jià)穩(wěn)心顆粒對(duì)房顫患者心臟結(jié)構(gòu)重構(gòu)及炎癥因子的影響。方法 檢索PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of Science、中國(guó)學(xué)術(shù)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)（CNKI）、萬方數(shù)據(jù)庫(kù)（Wanfang Data）、中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(kù)（CBM）、維普生物醫(yī)學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)（VIP）中穩(wěn)心顆粒治療房顫的臨床隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)（RCTs）；使用Excel錄入文獻(xiàn)基本信息；使用RevMan 5.4進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)、異質(zhì)性檢驗(yàn)及森林圖繪制；使用StataMP 17.0進(jìn)行漏斗圖繪制及Egger檢驗(yàn)。結(jié)果 共納入39項(xiàng)RCTs，包含4 211例研究對(duì)象。Meta分析結(jié)果顯示：穩(wěn)心顆粒可提高房顫患者左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF，MD＝6.01，95%置信區(qū)間（CI）［5.03，6.99］，P＜0.000 01），降低房顫患者左室舒張末期內(nèi)徑（LVEDd，MD＝-6.35，95% CI ［-7.66，-5.04］，P＜0.000 01）、左室收縮末期內(nèi)徑（LVESd，MD＝-4.35，95% CI［-4.80，-3.90］，P＜0.000 01）、左房?jī)?nèi)徑（LAd，MD＝-3.63，95% CI ［-5.43，-1.83］，P＜0.000 1）、超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP，MD＝-2.28，95% CI ［-3.07，-1.48］，P＜0.000 01）、C反應(yīng)蛋白（CRP，MD＝-5.71，95% CI ［-6.62，-4.79］，P＜0.000 01）、白細(xì)胞介素-6（IL-6，MD＝-10.37，95% CI ［-17.00，-3.74 ］，P ＝ 0.002 ）、基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9，MD＝-23.27，95% CI ［-26.42，-20.11］，P＜0.000 01）、基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2，MD＝-55.85，95% CI［-90.44，-21.27］，P＝0.002），其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。試驗(yàn)組不良反應(yīng)發(fā)生率低于對(duì)照組（RR＝0.74，95% CI ［0.59，0.93］，P＝0.009），其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 穩(wěn)心顆?？筛纳品款澔颊呓Y(jié)構(gòu)重構(gòu)指標(biāo)、降低炎癥因子，且安全性較好。
2024, 47(9):2147-2156.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.023
摘要:
目的 分析中醫(yī)藥治療外感寒、熱及外寒內(nèi)熱型咳嗽用藥特點(diǎn)，為臨床用藥提供參考。方法 通過查閱中醫(yī)古籍、中國(guó)學(xué)術(shù)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)（CNKI）、萬方數(shù)據(jù)庫(kù)（Wanfang Data）、維普生物醫(yī)學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)（VIP）等平臺(tái)檢索篩選中藥治療風(fēng)寒襲肺、風(fēng)熱犯肺和外寒內(nèi)熱型咳嗽的處方，使用中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)（V2.5）分析3類證型處方中藥的藥物頻次、性味歸經(jīng)、關(guān)聯(lián)規(guī)則分析。結(jié)果 風(fēng)寒襲肺型咳嗽共包含處方263條，184味中藥，其中使用頻次較高的有甘草、杏仁、麻黃、桔梗、半夏、陳皮等中藥。風(fēng)熱犯肺型咳嗽共包含處方314條，217味中藥，其中使用頻次較高的有甘草、杏仁、桔梗、黃芩、麻黃、桑白皮等藥物。外寒內(nèi)熱型咳嗽共包含處方102條，有128味中藥，其中使用頻次較高的有甘草、杏仁、麻黃、黃芩、半夏、桔梗等藥物。結(jié)論 統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果表明治療3類證型咳嗽多以解表藥、止咳化痰藥、理氣藥為主，藥性多溫、平，藥味辛、甘，歸入肺、脾經(jīng)等。
目的 分析中醫(yī)藥治療外感寒、熱及外寒內(nèi)熱型咳嗽用藥特點(diǎn)，為臨床用藥提供參考。方法 通過查閱中醫(yī)古籍、中國(guó)學(xué)術(shù)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)（CNKI）、萬方數(shù)據(jù)庫(kù)（Wanfang Data）、維普生物醫(yī)學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)（VIP）等平臺(tái)檢索篩選中藥治療風(fēng)寒襲肺、風(fēng)熱犯肺和外寒內(nèi)熱型咳嗽的處方，使用中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)（V2.5）分析3類證型處方中藥的藥物頻次、性味歸經(jīng)、關(guān)聯(lián)規(guī)則分析。結(jié)果 風(fēng)寒襲肺型咳嗽共包含處方263條，184味中藥，其中使用頻次較高的有甘草、杏仁、麻黃、桔梗、半夏、陳皮等中藥。風(fēng)熱犯肺型咳嗽共包含處方314條，217味中藥，其中使用頻次較高的有甘草、杏仁、桔梗、黃芩、麻黃、桑白皮等藥物。外寒內(nèi)熱型咳嗽共包含處方102條，有128味中藥，其中使用頻次較高的有甘草、杏仁、麻黃、黃芩、半夏、桔梗等藥物。結(jié)論 統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果表明治療3類證型咳嗽多以解表藥、止咳化痰藥、理氣藥為主，藥性多溫、平，藥味辛、甘，歸入肺、脾經(jīng)等。
2024, 47(9):2157-2167.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.024
摘要:
肺癌是世界范圍內(nèi)最常見的呼吸道惡性腫瘤，因其較高的發(fā)病率和致死率，已嚴(yán)重危害人類的身心健康。中醫(yī)藥在抗肺癌綜合治療方面應(yīng)用歷史悠久，優(yōu)勢(shì)突出，療效良好，而中藥活性成分大多具有良好的抗肺癌作用。研究發(fā)現(xiàn)，一些中藥活性成分可以通過靶向肺癌信號(hào)通路，調(diào)節(jié)肺癌腫瘤免疫微環(huán)境中巨噬細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、髓系抑制細(xì)胞、T細(xì)胞、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞以及樹突狀細(xì)胞等免疫細(xì)胞，改善肺癌腫瘤免疫微環(huán)境，提高免疫細(xì)胞的功能和活性，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，逆轉(zhuǎn)機(jī)體免疫抑制狀態(tài)，從而發(fā)揮抗肺癌治療的作用。通過收集近年來國(guó)內(nèi)外中藥活性成分（淫羊藿多糖、丹參酮Ⅰ、黃芪甲苷、牡荊素、人參皂苷、薯蕷皂苷、姜黃素、丹參酮ⅡA、大黃素、黃芪多糖、紅景天苷、靈芝多糖、白藜蘆醇等）在抗肺癌治療中的相關(guān)研究報(bào)道，從中藥活性成分調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞及其抗肺癌作用具體機(jī)制方面進(jìn)行論述，以期為相關(guān)新型臨床抗肺癌藥物的研發(fā)提供新的理論依據(jù)。
肺癌是世界范圍內(nèi)最常見的呼吸道惡性腫瘤，因其較高的發(fā)病率和致死率，已嚴(yán)重危害人類的身心健康。中醫(yī)藥在抗肺癌綜合治療方面應(yīng)用歷史悠久，優(yōu)勢(shì)突出，療效良好，而中藥活性成分大多具有良好的抗肺癌作用。研究發(fā)現(xiàn)，一些中藥活性成分可以通過靶向肺癌信號(hào)通路，調(diào)節(jié)肺癌腫瘤免疫微環(huán)境中巨噬細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、髓系抑制細(xì)胞、T細(xì)胞、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞以及樹突狀細(xì)胞等免疫細(xì)胞，改善肺癌腫瘤免疫微環(huán)境，提高免疫細(xì)胞的功能和活性，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，逆轉(zhuǎn)機(jī)體免疫抑制狀態(tài)，從而發(fā)揮抗肺癌治療的作用。通過收集近年來國(guó)內(nèi)外中藥活性成分（淫羊藿多糖、丹參酮Ⅰ、黃芪甲苷、牡荊素、人參皂苷、薯蕷皂苷、姜黃素、丹參酮ⅡA、大黃素、黃芪多糖、紅景天苷、靈芝多糖、白藜蘆醇等）在抗肺癌治療中的相關(guān)研究報(bào)道，從中藥活性成分調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞及其抗肺癌作用具體機(jī)制方面進(jìn)行論述，以期為相關(guān)新型臨床抗肺癌藥物的研發(fā)提供新的理論依據(jù)。
2024, 47(9):2168-2175.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.025
摘要:
傳統(tǒng)滅活、減毒疫苗的感染風(fēng)險(xiǎn)和亞單位疫苗的低免疫原性限制了疫苗的臨床應(yīng)用，近年來，基于納米遞送載體的疫苗因其優(yōu)秀的靶向遞送、抗原呈遞效果受到廣泛關(guān)注。通過調(diào)控納米遞送載體的物理化學(xué)性質(zhì)，基于納米遞送載體的疫苗可以模擬天然感染過程，精準(zhǔn)將特異性抗原快速遞送到淋巴結(jié)或靶部位，促進(jìn)抗原呈遞細(xì)胞的成熟和抗原的交叉呈遞，激活效應(yīng)免疫細(xì)胞，誘導(dǎo)強(qiáng)大的免疫反應(yīng)，納米疫苗還能與免疫檢查點(diǎn)抑制劑、腫瘤血管生成抑制劑等藥物進(jìn)行聯(lián)合治療，預(yù)防疾病的復(fù)發(fā)，降低其不良反應(yīng)。綜述了納米遞送載體的被動(dòng)靶向、生物相容性、主動(dòng)靶向、改善免疫應(yīng)答和誘導(dǎo)黏膜免疫應(yīng)答的功能，以及近年來基于納米遞送載體的疫苗在腫瘤免疫治療、自身免疫性疾病和傳染病預(yù)防等方面的應(yīng)用進(jìn)展，并討論其未來發(fā)展與面臨的挑戰(zhàn)。
傳統(tǒng)滅活、減毒疫苗的感染風(fēng)險(xiǎn)和亞單位疫苗的低免疫原性限制了疫苗的臨床應(yīng)用，近年來，基于納米遞送載體的疫苗因其優(yōu)秀的靶向遞送、抗原呈遞效果受到廣泛關(guān)注。通過調(diào)控納米遞送載體的物理化學(xué)性質(zhì)，基于納米遞送載體的疫苗可以模擬天然感染過程，精準(zhǔn)將特異性抗原快速遞送到淋巴結(jié)或靶部位，促進(jìn)抗原呈遞細(xì)胞的成熟和抗原的交叉呈遞，激活效應(yīng)免疫細(xì)胞，誘導(dǎo)強(qiáng)大的免疫反應(yīng)，納米疫苗還能與免疫檢查點(diǎn)抑制劑、腫瘤血管生成抑制劑等藥物進(jìn)行聯(lián)合治療，預(yù)防疾病的復(fù)發(fā)，降低其不良反應(yīng)。綜述了納米遞送載體的被動(dòng)靶向、生物相容性、主動(dòng)靶向、改善免疫應(yīng)答和誘導(dǎo)黏膜免疫應(yīng)答的功能，以及近年來基于納米遞送載體的疫苗在腫瘤免疫治療、自身免疫性疾病和傳染病預(yù)防等方面的應(yīng)用進(jìn)展，并討論其未來發(fā)展與面臨的挑戰(zhàn)。
2024, 47(9):2176-2181.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.026
摘要:
中藥上市后變更是已上市中藥持續(xù)管理的重要環(huán)節(jié)，直接關(guān)系到中藥的安全性、有效性、質(zhì)量可控性，但以往中藥上市后變更存在管理路徑不清晰、研究驗(yàn)證欠缺等問題，不利于提升已上市中藥的質(zhì)量。對(duì)福建省近10年中藥上市后變更研究資料進(jìn)行回顧性分析，結(jié)合溝通交流案例、審評(píng)檢查經(jīng)驗(yàn)，梳理出中藥上市后變更研究中存在的典型問題，并針對(duì)典型問題提出了關(guān)注中藥變更的必要性及合理性、系統(tǒng)全面開展中藥變更研究、完善中藥變更相關(guān)指導(dǎo)原則、加強(qiáng)中西藥復(fù)方制劑變更管理等建議。以期為藥品上市許可持有人開展中藥上市后變更研究和藥監(jiān)部門實(shí)施中藥上市后變更監(jiān)管提供技術(shù)參考。
中藥上市后變更是已上市中藥持續(xù)管理的重要環(huán)節(jié)，直接關(guān)系到中藥的安全性、有效性、質(zhì)量可控性，但以往中藥上市后變更存在管理路徑不清晰、研究驗(yàn)證欠缺等問題，不利于提升已上市中藥的質(zhì)量。對(duì)福建省近10年中藥上市后變更研究資料進(jìn)行回顧性分析，結(jié)合溝通交流案例、審評(píng)檢查經(jīng)驗(yàn)，梳理出中藥上市后變更研究中存在的典型問題，并針對(duì)典型問題提出了關(guān)注中藥變更的必要性及合理性、系統(tǒng)全面開展中藥變更研究、完善中藥變更相關(guān)指導(dǎo)原則、加強(qiáng)中西藥復(fù)方制劑變更管理等建議。以期為藥品上市許可持有人開展中藥上市后變更研究和藥監(jiān)部門實(shí)施中藥上市后變更監(jiān)管提供技術(shù)參考。
2024, 47(9):2182-2196.
DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2024.09.027
摘要:
抑郁癥作為一種精神障礙性疾病，嚴(yán)重危害患者身心健康。目前臨床治療抑郁癥多以化學(xué)藥物為主，這類藥物主要通過不同作用途徑增加突觸間隙單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的濃度，改善患者抑郁癥狀。抑郁癥治療周期較長(zhǎng)，盡管化學(xué)藥物可以在短期內(nèi)發(fā)揮療效，長(zhǎng)期服用時(shí)不良反應(yīng)明顯。傳統(tǒng)中醫(yī)藥在治療精神類疾病方面歷史悠久、經(jīng)驗(yàn)豐富，對(duì)于抑郁癥的防治具有重要意義。單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的調(diào)節(jié)仍是臨床治療抑郁癥最主要的方式，立足于中醫(yī)基礎(chǔ)理論，主要對(duì)臨床常用單味中藥（茯苓、當(dāng)歸、柴胡、白芍、酸棗仁、白術(shù)、遠(yuǎn)志、合歡皮）及復(fù)方（逍遙散、開心散、柴胡疏肝散、越鞠丸、半夏厚樸湯）通過調(diào)控單胺類神經(jīng)遞質(zhì)治療抑郁癥的作用機(jī)制進(jìn)行綜述，以期發(fā)揮傳統(tǒng)中醫(yī)藥治療優(yōu)勢(shì)，為抑郁癥的中西醫(yī)結(jié)合治療提供參考。
抑郁癥作為一種精神障礙性疾病，嚴(yán)重危害患者身心健康。目前臨床治療抑郁癥多以化學(xué)藥物為主，這類藥物主要通過不同作用途徑增加突觸間隙單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的濃度，改善患者抑郁癥狀。抑郁癥治療周期較長(zhǎng)，盡管化學(xué)藥物可以在短期內(nèi)發(fā)揮療效，長(zhǎng)期服用時(shí)不良反應(yīng)明顯。傳統(tǒng)中醫(yī)藥在治療精神類疾病方面歷史悠久、經(jīng)驗(yàn)豐富，對(duì)于抑郁癥的防治具有重要意義。單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的調(diào)節(jié)仍是臨床治療抑郁癥最主要的方式，立足于中醫(yī)基礎(chǔ)理論，主要對(duì)臨床常用單味中藥（茯苓、當(dāng)歸、柴胡、白芍、酸棗仁、白術(shù)、遠(yuǎn)志、合歡皮）及復(fù)方（逍遙散、開心散、柴胡疏肝散、越鞠丸、半夏厚樸湯）通過調(diào)控單胺類神經(jīng)遞質(zhì)治療抑郁癥的作用機(jī)制進(jìn)行綜述，以期發(fā)揮傳統(tǒng)中醫(yī)藥治療優(yōu)勢(shì)，為抑郁癥的中西醫(yī)結(jié)合治療提供參考。
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