摘要: 目的 采用超高效液相色譜-四極桿-飛行時間質(zhì)譜法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)分析鑒定大鼠ig給藥白術(shù)后血清、尿液/糞便和組織中的原型成分及代謝產(chǎn)物,研究白術(shù)化學(xué)成分在大鼠體內(nèi)的分布差異,并推測其代謝途徑。方法 SD健康大鼠27只,按照人體等效劑量的2倍高倍劑量ig給予白術(shù)水煎液,制備給藥后大鼠血清、尿液/糞便和組織(腸、肝、腎、脾、心、腦)的甲醇提取液,采用電噴霧離子源(ESI)正、負(fù)離子模式下檢測。根據(jù)實驗得到的化合物相對保留時間、質(zhì)荷比、準(zhǔn)分子離子峰及特征碎片離子等信息,與對照品、文獻(xiàn)數(shù)據(jù)、MassBank Europe數(shù)據(jù)庫、MassBank of North America數(shù)據(jù)庫以及安捷倫個人化合物數(shù)據(jù)庫與譜庫(PCDL)進(jìn)行比較,鑒定白術(shù)在大鼠體內(nèi)的原型成分代謝產(chǎn)物與代謝產(chǎn)物,推測其代謝途徑。結(jié)果 基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技術(shù)結(jié)合本課題組前期對白術(shù)藥材成分定性分析結(jié)果,大鼠血清中共鑒定出原型成分53個、代謝型成分54個;大鼠尿液中共鑒定出原型成分56個、代謝型成分48個;大鼠糞便中共鑒定出原型成分90個、代謝型成分53個;大鼠各組織中共鑒定出原型成分62個、代謝型成分54個。原型成分主要涉及酚酸類、萜類、有機(jī)酸類等;代謝型成分主要來自酚酸類、萜類等。其中,在腸、肝、腎、脾等組織中富集的原型成分主要以萜類物質(zhì)為主。結(jié)論 建立的UPLC-Q-TOF-MS/MS分析方法能有效鑒別白術(shù)在大鼠體內(nèi)的原型及代謝型成分群。白術(shù)在大鼠體內(nèi)主要進(jìn)行Ⅰ相和Ⅱ相代謝反應(yīng)。其中,綠原酸類成分在大鼠體內(nèi)代謝較快,生成多種酚酸類物質(zhì),且其代謝產(chǎn)物主要通過腎臟排泄。而萜類成分在大鼠體內(nèi)多以原型形式存在,代謝較為緩慢,且在腸、肝、腎、脾等組織中顯著富集,結(jié)合相關(guān)報道的白術(shù)健脾、補(bǔ)氣、保肝的藥理作用,推測萜類成分是白術(shù)潛在的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。
摘要: 目的 綜合運(yùn)用數(shù)據(jù)挖掘、關(guān)聯(lián)分析、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)以及分子對接等方法研究含靈芝保健食品的組方規(guī)律,并探討其潛在作用機(jī)制。方法 從國家市場監(jiān)督管理總局和藥智網(wǎng)收集含靈芝保健品的備案信息,分析原料中藥及其配伍規(guī)律。整合中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺(Traditional Chinese Medicine Systematic Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)、本草組鑒(Herbal Expert Review,HERB)等多個數(shù)據(jù)庫及檢索相關(guān)文獻(xiàn),收集靈芝的活性成分,借助SwissTargetPrediction平臺預(yù)測其作用靶點。通過GeneCards、OMIM等數(shù)據(jù)庫收集靈芝主要保健功能的關(guān)鍵靶點,并運(yùn)用String數(shù)據(jù)庫、Cytoscape軟件構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)篩選核心靶點,并進(jìn)行基因本體(gene ontology,GO)功能和京都基因與基因組百科全書(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集研究,最終運(yùn)用AutoDock軟件完成分子對接驗證。結(jié)果 納入857種含靈芝保健品,涉及201味中藥,功效以止咳平喘、補(bǔ)氣安神為主,四氣以平為主,五味以甘為主,歸經(jīng)以肺經(jīng)、腎經(jīng)、心經(jīng)、肝經(jīng)為主,劑型以膠囊劑為主,主要保健功能為“有助于增強(qiáng)免疫力”(571次)。篩選得到靈芝活性成分298個、作用靶點1 114個,靈芝增強(qiáng)免疫力潛在靶點367個、核心靶點67個。靈芝增強(qiáng)免疫力的作用主要與對外源性刺激的反應(yīng)等過程及癌癥通路、乙型肝炎病毒、脂質(zhì)與動脈粥樣硬化通路等信號通路相關(guān)。分子對接表明,靈芝的關(guān)鍵活性成分與核心靶點能夠自發(fā)穩(wěn)定結(jié)合。結(jié)論 綜合運(yùn)用數(shù)據(jù)挖掘、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)及分子對接等方法,深入剖析含靈芝保健食品的原料配伍規(guī)律及其增強(qiáng)免疫力機(jī)制通路,初步揭示靈芝活性成分的關(guān)鍵作用靶點及信號通路,從而為靈芝后續(xù)保健品開發(fā)提供科學(xué)的理論支持。